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不同DNA聚合酶MIX作用差别之谈
迪迪f
2015/09/28
私聊
PCR
配置PCR体系需要DNA模板,引物,4种dNTP混合物,Taq DNA聚合酶,Mg2+,缓冲液和水等多种物质。一般在实验中,DNA模板和引物是根据自己的实际情况来选择,其他的东西在不同的PCR体系中可以通用,因此,很多公司把其他的剩余物质都组合在一起制成MIX试剂卖给我们。这种MIX不但给我们实验带来了方便,也给公司带来了收入,一举两得。
可是,凡事都有两面性,随之而来的也有问题了。这种MIX受到这么大的欢迎,因此,不同厂家开始自己生产,甚至不同厂家有不同的MIX体系。从颜色分,MIX有紫色,绿色,蓝色,无色等多种色系;从价位来分,从几十到上千不等;从效果来分,有普通的,高保真,快速的等多种类别,这么多种足以让我们眼花缭乱。面对这么多种,类似我这样的有选择综合症的人几乎要崩溃,还好,有实验室的前辈们帮忙,问题也就迎刃而解了。
首先,对PCR扩增要求不高的,可以选用普通的MIX。一般的实验室有经常用的一类值得信赖的产品。当然,如果有公司过来推销,可以先用试用装,如果效果好,价格也好的话,可以继续使用,甚至推广。而对于一些扩增片段长的,扩增片段碱基含量特异的或者退火温度有要求的,可以选用特异的MIX,因为有些MIX的设计是专门针对PCR扩增时的特殊要求的,例如对于一些要求扩增片段无差异的,最好选用高保真酶。当然,有针对特殊功能的MIX一般价格也比较高,不过如果能达到目的的话还算物有所值,经常花了钱也的不到结果。所以面对一些难以扩增的片段,最好采用多种酶同时扩增,这样成功的几率大很多。
即使是有这么多的MIX产品,仍旧有一批人坚持自己配PCR体系。所以说选用哪种产品,哪种方法是关键还是取决于实验需要。
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