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色谱小知识——色谱分离三要素

一片枫叶

2015/11/27

液相色谱（LC）

液相色谱中死时间几种测定方法
1：有响应的溶剂出峰时间为死时间。
2：进样后的阀切换峰，对应的时间为死时间。
3：工作站中输入色谱柱的空余体积或孔隙率，自动计算。（对于C18柱，也可以用硝酸钠或硫脲等在色谱柱上完全不保留组分的出峰时间来测定死时间。）
影响分离度的因素
有三个因素控制两个色谱峰之间的分离度——容量因子，选择性，柱效
容量因子反映样品分子和固定相及流动相之间的作用力，选择性是说明色谱系统区分两个或多个色谱峰的能力，柱效与色谱峰的宽度有关，很明显要达到一定的分离度，宽色谱峰要比窄色谱峰需要更大的分离度选择性。
理论塔板数越高柱效越高，柱效的高低受柱内效应和柱外效应的影响。
选择性是固定相区分两个被分离样品组分的能力，用容量因子之比进行计算，它是两个被分离色谱峰顶点距离的量度，如果选择性是Ⅰ，则两个组分完全不能分离。选择性数值越高，分离越好。
由于选择性取决于被分离物的物理和化学结构，流动相和固定相，流动相组成，PH，色谱柱温度，流动相添加剂，因此，尽量优化实验条件提高选择性以降低成本。
容量因子为物质的特性，当分析条件一定时，容量因子为固定值。
溶剂的洗脱强度与其极性有关：
反相色谱：溶剂的极性越强，洗脱强度越弱。
正相色谱：溶剂的极性越强，洗脱能力越强。（注意：不可以使用纯水作为正想色谱的流动相）
一般样品分析要求：容量因子大于2小于5

分
该帖子已被版主-夏天的雪加2积分，加2经验;加分理由:感谢分享

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老多_小多

第1楼2015/11/27

死时间有没有人去理会？呵呵

0

夏天的雪

第2楼2015/11/27

应助达人

借楼主帖子也来分享关于分离度及其影响因素，来源于网络

0

夏天的雪

第3楼2015/11/27

应助达人

都已经“死”了，估计没多少人会去理会了
老多_小多(emoc98311) 发表:死时间有没有人去理会？呵呵

0

一片枫叶

第4楼2015/11/27

应助达人

死时间的大小直接影响到容量因子的大小。可以安装柱识别卡套或者在“编辑柱识别组件”中输入死时间/空余体积/空隙率，以用于系统适应性计算，对色谱柱性能正确评价。
老多_小多(emoc98311) 发表:死时间有没有人去理会？呵呵

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一片枫叶

第5楼2015/11/27

应助达人

死时间的增大寓意着柱空隙率的增大，柱空隙率大会使保留因子降低，保留性能也会受影响。
夏天的雪(bingwang228) 发表: 都已经“死”了，估计没多少人会去理会了

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夏天的雪

第6楼2015/11/30

应助达人

死时间与柱外死体积也有点关系
一片枫叶(v2960432) 发表: 死时间的增大寓意着柱空隙率的增大，柱空隙率大会使保留因子降低，保留性能也会受影响。

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一片枫叶

第7楼2015/11/30

应助达人

对！柱外死体积以及柱孔隙率的大小都影响着死时间。
夏天的雪(bingwang228) 发表: 死时间与柱外死体积也有点关系

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