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【讨论】液相色谱中,在连续两个单进样之间平衡色谱柱重要吗?

  • cherry_sun
    2009/04/23
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 最近在学习用UPLC,样品一个一个的做,流动相选择的都不同,我只是在测完一个就用大比例有机相洗一两分钟柱子(反向柱),然后执行下一个样,流动相往往立刻切换。
    昨天看资料上有提到平衡色谱柱的概念,请问这个是什么时候用,作用大吗?我的理解是一个样品测完,改为下一个样品的初始流动相比例流一段时间再进下个样品,对不?
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  • 老多_小多

    第1楼2009/04/23

    重要,特别是走梯度,不平衡保留时候会差很多

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  • bestalian

    第2楼2009/04/23

    流动相的切换前,要先用异丙醇冲洗系统,后换上要使用的流动相,而且还要平衡一段时间,就是楼主说的流一段时间的流动相,再进样。否则样品的保留时间变化很大的,

    cherry_sun 发表:最近在学习用UPLC,样品一个一个的做,流动相选择的都不同,我只是在测完一个就用大比例有机相洗一两分钟柱子(反向柱),然后执行下一个样,流动相往往立刻切换。
    昨天看资料上有提到平衡色谱柱的概念,请问这个是什么时候用,作用大吗?我的理解是一个样品测完,改为下一个样品的初始流动相比例流一段时间再进下个样品,对不?

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  • cherry_sun

    第3楼2009/04/23

    为什么要用异丙醇冲洗系统呢?那就是要准备一个异丙醇色谱瓶了,机器上有4个管路,分别是A1A2B1B2,我放哪个合适呢?

    bestalian 发表:流动相的切换前,要先用异丙醇冲洗系统,后换上要使用的流动相,而且还要平衡一段时间,就是楼主说的流一段时间的流动相,再进样。否则样品的保留时间变化很大的,

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  • cherry_sun

    第4楼2009/04/23

    哦~~,多谢了。

    emoc98311 发表:重要,特别是走梯度,不平衡保留时候会差很多

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  • 123angel

    第5楼2009/04/23

    很重要,当你用的方法不同时,必须要平衡色谱柱,还有用梯度的时候,要保留平衡的时间,不然时间会对不上的,基线也会不好

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  • bestalian

    第6楼2009/04/23

    异丙醇作为一个可以过度的溶液
    是要准备一个放异丙醇的瓶子,是用来冲你要改变的那个通道,所以它没有固定的通道,要更换那个通道的流动相,就冲那个通道

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  • yuzhulu

    第7楼2009/04/23

    你改变初始流动相比例算是走梯度,最好是要平衡一段时间,要不然保留时间会变,基线不稳影响判断。

    cherry_sun 发表:最近在学习用UPLC,样品一个一个的做,流动相选择的都不同,我只是在测完一个就用大比例有机相洗一两分钟柱子(反向柱),然后执行下一个样,流动相往往立刻切换。
    昨天看资料上有提到平衡色谱柱的概念,请问这个是什么时候用,作用大吗?我的理解是一个样品测完,改为下一个样品的初始流动相比例流一段时间再进下个样品,对不?

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  • 〓猪哥哥〓

    第8楼2009/04/23

    两次进样之间的平衡是很重要的。由于有些物质在你使用的流动相比例下是洗脱不出来的,所以换较大比例来冲洗。第二次进样前的平衡很重要,我们一般平衡至少10min,等基线完全平衡好,再进样。

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  • 有水有渝

    第9楼2009/04/23

    应助达人

    直接走梯度更快,省得每次都要切换流动相

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  • 分子粒粒

    第10楼2009/04/23

    我是这样做的:如果是固定比例流动相测样品的话,就用流动相走一会就行了,不需要切换成大比例的,如果走梯度的话,需要平衡柱子,待基线走平基本就可以了。关机或更换柱子之前,用大比例有机相冲洗柱子。

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