0.1%磷酸、0.2%磷酸、0.5%磷酸，你试过流动相的区别吗

不同浓度的磷酸带来的是缓冲能力和pH值的差异，从而引起保留能力和峰形的变化。其实很多人都知道不同的pH值会引起保留时间的差异，但是大家都不是很关心为什么会有这种差异，这都是对缓冲的原理不重视引起的。缓冲的原理我认为时液相色谱的基石性质的东西，最好能有深刻的认识。

应助达人

在色谱柱的耐受范围内，PH值的增加会使弱酸性组分的保留增加，峰型会更好。

应助达人

这个只能自己试验了

非常同意一楼的观点。对于0.1%磷酸和0.5%磷酸磷酸，不同的物质可能有不同的表现，有的可能没有区别，有的可能就完全不一样了，这是由其pH和缓冲能力不同引起的。下面是我自己的例子，供大家参考。某药物纯度方法开发实例

至于选择，我肯定首选0.1%，不行再去加大浓度，毕竟浓度低对色谱柱好。

与样品的性质也有关系的啊，个人感觉还是要根据对应的样品进行分析。

一般用到0.1%，这个时候PH为2.0~2.1,0.2%为1.8左右吧，尽管寿命体现的不是那么明显，但是非特别需要可以不调到PH1.5以下，我这么看

我也是这个观点，其实大部分时候0.1%也够了

应助达人

与待测物的性质有关，多组分时不同的酸含量有可能会影响到分离度和峰型