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超氧阴离子清除率，为什么测出吸光度大于1？

  • 宾克斯的美Jiu
    2016/05/01
    • 私聊

紫外可见分光光度计（UV）

  • 我做大豆蛋白肽的超氧阴离子清除率，用的是邻苯三酚法，波长设置为325nm，可是最后用紫外光度计测时，前面2分钟吸光度是小于1，后面的吸光度就大于1了，算出来的结果是负数....
    为什么会出现这种情况？ 我有一次测的吸光度全是小于1的，这两次就测的有大于1的吸光度，请问是哪里出问题了？
    (PS: 有5个样，光度计只放一个调零的皿和装样液的皿，我5分钟测完一个样，再换另一个样来测，一个一个的测，其它没测的一直放在37度水浴保温。)
    （超氧阴离子自由基（O2－·）清除率测定
    取50mmol/L的Tris-HCl缓冲溶液（pH8.2）4.5mL和4.2mL蒸馏水混合均匀，在37℃水浴保温20min后，立即加入37℃预热的3mmol/L邻苯三酚0.5mL，迅速摇匀后倒入比色皿，以10mmoL/L的HCl溶液作参照，在325nm波长处每隔30s测定吸光度，连续测定5min，计算线性范围内邻苯三酚自氧化速率。按上述步骤在加入邻苯三酚之前，分别加入0.1mL不同浓度的样品溶液，相应减少蒸馏水的量，同样以10mmol/L的HCl溶液作参照，在325nm波长处测定吸光度，以吸光度对时间作图表示邻苯三酚自氧化的抑制情况。）
  • 分
  • 该帖子已被版主-过年杀只猪加2积分，加2经验;加分理由:话题
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    +关注 私聊

  • isomer

    第1楼2016/05/03

    您好，新手上路版的帖子浏览量较少，转到紫外可见光版了。
    下次发帖记得到对应版面，以免耽误您的问题。

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    +关注 私聊

  • yzx2011

    第2楼2016/05/04

    应助达人

    样品介质均匀吗

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    +关注 私聊

  • 宾克斯的美Jiu

    第3楼2016/05/05

    谢谢你！

    isomer(ijingle) 发表:您好，新手上路版的帖子浏览量较少，转到紫外可见光版了。
    下次发帖记得到对应版面，以免耽误您的问题。

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    +关注 私聊

  • 宾克斯的美Jiu

    第4楼2016/05/05

    是均匀的，就是不明白为什么最后的吸光度就大于1了

    yzx2011(yzx2011) 发表:样品介质均匀吗

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    +关注 私聊

  • yzx2011

    第5楼2016/05/06

    应助达人

    会不会是电源有问题

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    +关注 私聊

  • qianguiyun1

    第6楼2016/05/07

    应助达人

    比色皿有误差吧？

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    +关注 私聊

  • qianguiyun1

    第7楼2016/05/07

    应助达人

    吸光度太高了

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    +关注 私聊

  • 暗夜精灵

    第8楼2016/08/30

    是不是中途有反应。或者会变质之类的

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