还原CE-SDS

你的酶切是切糖吧,就是说重链的糖都被切掉了,所以会前移到NGHC的位置。
对于常规实验里HC分裂的情况，我们一般认为是由于毛细管没完全处理好造成的，建议使用1M NaOH冲洗10min后重新precondition.

对，酶切是切糖，重链位置移动我也能理解。但是切掉糖之后重链明显不出现裂峰了，这还能说是毛细管处理不好的问题吗？

所以我是怀疑是不是我在处理的过程中哪一步导致了样品的异构？？样品pH在6左右，稀释至2.5mg/mL，5μL 巯基乙醇，55μL Beckman的Sample Buffer（pH在8左右），70℃，10分钟，等待样品冷却后进样。我实在是想不通哪里出了问题，头大··· ···

我正在尝试您的建议，非常感谢您的热情帮助！

毛细管仍然是有可能影响的.事实上从样品处理,没有可能发生所谓的"异构".
目测你的样品终浓度偏高,应当保持在1mg/mL附近。

如果按照beckman的试剂盒来操作的话，样品浓度至少要大于2.23mg/ml才可以啊。做过更高浓度的样品，从来没遇到过裂峰的情况。如果其他人做也是这样的话，会不会是样品本身发生了变化，可能保存不当

如果是毛细管的话，那为什么同批次的其他样品没有这个问题？都是一同处理的
样品的终浓度就是1mg/mL。
也反复用酸碱和水冲洗过毛细管，然后进样，还是无效
唉~

我也怀疑呢，明明去年做就啥事也没有啊，但问题是原研药也是这个样子，我都是保存在-80的冰箱里的，保存时间也才8个月左右，不至于吧

建议用同批次的样品同一天制备,采用同一瓶胶,先后进样,进行比较.我怎么就不信一个开衩一个不开衩呢呵呵

唉，两年不接触CE，我发现我现在已经回答不了版友们的很多问题了

溶液的浓度越低，时间久了之后，溶液发生变化的可能性越大。
比如说储存液的浓度都是比较大的。