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红霉素的液相条件

  • 雨诗baby
    2016/06/01
  • 私聊

液质联用(LCMS)

  • 有没有在做红霉素液相的大神,最近做红霉素液相一点进展都没有,试了各种液相条件,都没有达到理想的效果,要不然就是不出峰,要不然就是浓度和峰面积不成比例。又跑去分析中心测,最后的结果说在210nm处没有吸收峰。分析中心的用的流动相是:A0.1%的甲酸+10mmol的乙酸铵,B甲醇,以梯度洗提的方式A:B=95:5到5:95.最后在210处没有任何峰了,,问问题可能出在了哪里
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  • qgp

    第1楼2016/06/02

    液相色谱条件
    色谱柱:C18 (150 mm?2.1 mm,粒径5 μm),或相当者;
    流动相: 流动相: A:甲醇, B:0.01 ‰ 0.01 ‰ 乙酸水溶液 ;
    梯度洗脱: 0.0 ~1.0 min ,30 %A;1.0 1~7 min,95 %A;7.01 7.01~17 min;30 %A;
    流速: 0.3 mL/min
    柱温: 25 ℃;
    进样量:25 μL。

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  • 雨诗baby

    第2楼2016/06/02

    您好,请问用这种方法有做出来吗?这种方法是对Ea、EB、EC分离吗?谢谢

    qgp(qgp) 发表:液相色谱条件
    色谱柱:C18 (150 mm?2.1 mm,粒径5 μm),或相当者;
    流动相: 流动相: A:甲醇, B:0.01 ‰ 0.01 ‰ 乙酸水溶液 ;
    梯度洗脱: 0.0 ~1.0 min ,30 %A;1.0 1~7 min,95 %A;7.01 7.01~17 min;30 %A;
    流速: 0.3 mL/min
    柱温: 25 ℃;
    进样量:25 μL。

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  • 雨诗baby

    第3楼2016/06/02

    对应的测定波长是多少呢,我试的时候都是用210和215nm这两个,谢谢

    qgp(qgp) 发表:液相色谱条件
    色谱柱:C18 (150 mm?2.1 mm,粒径5 μm),或相当者;
    流动相: 流动相: A:甲醇, B:0.01 ‰ 0.01 ‰ 乙酸水溶液 ;
    梯度洗脱: 0.0 ~1.0 min ,30 %A;1.0 1~7 min,95 %A;7.01 7.01~17 min;30 %A;
    流速: 0.3 mL/min
    柱温: 25 ℃;
    进样量:25 μL。

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  • hujiangtao

    第4楼2016/06/02

    应助达人

    分子量太大的不好做

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  • 雨诗baby

    第5楼2016/06/02

    看到很多文献,红霉素的定性测试都可以做出来,我用同样的方法,就不能出峰或者出峰的效果不怎么好。同时我做的藻毒素和这个分子量差不多,走了一次液相就出来了,峰形也很好。就是不知道红霉素是什么情况。。谢谢帮助

    hujiangtao(hujiangtao) 发表:分子量太大的不好做

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  • 雨诗baby

    第7楼2016/06/03

    那您的一些测定波长等一些条件可以参考下吗?我买的药品说明书上也是差不多是这种条件,可是我过液相,但是物质洗脱不开的,可以参考您的色谱图吗?谢谢

    p3113945(p3113945) 发表:[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp]液质经常做红霉素,红霉素在酸性条件下不稳定,流动相乙腈(甲醇也可以),0.05%乙酸水溶液...
    [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp]液质因为对液相方法需求不严苛,所以我一直不走梯度,55%有机相等度做,没什么问题。
    另:发现问题用排除法慢慢找原因..

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  • p3113945

    第8楼2016/06/03

    [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp]液质方法没有DAD监测器的,样品带基质吗?

    雨诗baby(v3110244)发表: 那您的一些测定波长等一些条件可以参考下吗?我买的药品说明书上也是差不多是这种条件,可是我过液相,但是物质洗脱不开的,可以参考您的色谱图吗?谢谢

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  • 雨诗baby

    第10楼2016/06/03

    液相的时候不是要设置相关的波长吗?您设置的多少呢,我用紫外分光光度计对红霉素溶液扫峰,但是都没有扫出来,您看下附件,谢谢

    雨诗baby(v3110244) 发表: 不带的,我买的是红霉素纯品,是EA、EB、EC三种物质的混合,EA是很大一部分的 ,谢谢,可以看看您的色谱图,和一些液相条件吗?

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