色谱峰保留时间变化常见原因和解决方法

在反相色谱中，如果分析离子或离子化的样品，保留时间会受到缓冲溶液的离子强度的影响，但是影响会很小，通常可以忽略不计。典型的状况是缓冲液的摩尔数改变20%，保留时间变化约1%。由于缓冲液组分通常是称量的，那么大的误差是不会发生的。
在离子对色谱中，离子对试剂的浓度会影响离子化样品的保留。与离子对试剂电荷相反的分析物保留时间会增加，相同电荷的保留时间减少，中性化合物基本不受影响。在低浓度下，例如小于5 mM/L，样品组分保留时间的变化受与离子对试剂浓度影响，与离子对试剂的浓度成正比。在高浓度离子对试剂下，例如10 mM/L左右，填料表面被离子对试剂饱和，那么试剂浓度的改变不会对样品保留时间有明显的影响。这是在方法开发时需要考虑的问题。如果你需要把方法做到不受任一个变量的影响，那就应该那么做。

在正相色谱中，保留时间对流动相中极性组分的浓度非常敏感。这个组分无论是你需要还是不需要的，通常是指水。水含量的变化会导致保留时间的变化，比较好的解决办法是使用半饱和的非极性溶剂，例如正己烷或二氯甲烷。为了达到半饱和状态，通常需要往一定体积的溶剂中加一些水，搅拌一段时间使其饱和，然后把它和等体积的“干燥”溶剂混合。通过这个过程，理论上能让你在使用含水非极性溶剂时得到比较好的重现性，避免保留时间的漂移。

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液相的保留时间貌似没有气相那么稳定

液相稳定了，保留时间也差不多。