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HPLC做色素，有些出峰了，有些峰没分离，求大神帮我看看是哪里出问题了。。。。

m3008626

2016/12/15

液相色谱（LC）

A：乙腈 B：水 C：乙酸铵
配制混标，新红、日落黄、柠檬黄、苋菜红为0.5、1、2、4、10、20ug/ml （中国计量科学研究院购买的）
流动相：乙腈、乙酸铵
洗脱： 0~5min，乙腈：乙酸铵 5:95
5~30，乙腈：乙酸铵 40:60
30~35，乙腈：乙酸铵 5:95
流速：1ml/min
柱温：35
进样量：10ul
波长：254nm

柱子：月旭 C18 46mm*250mm 5um（新柱子）基线平衡了1.5h，有些出峰了，有些峰没分离，求大神帮我看看是哪里出问题了。。。。（如图所示）
总共配了4个物质，却只出了2个峰，标液用水直接稀释的，跑过单标，单标全部出峰了，求经验交流下还有没有用乙腈、乙酸铵做这四种色素成功的色谱条件
仪器：赛默飞U3000

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活到九十学到一百

第1楼2016/12/15

洗脱条件改一下看看，按照GB 5009.35的条件设置。

0

夏天的雪

第2楼2016/12/15

应助达人

建议将乙腈换成甲醇进行测定，新红和日落黄可能会出现重叠

0

武灵

第3楼2016/12/16

第一个图看到的那个高峰也是组分峰吗？

0

有水有渝

第4楼2016/12/16

应助达人

单标都出来了，走单标时有发现保留时间一样的吗，走单标的流动相与你上面的流动相一致的吗，能把单标的图都发上来看一下吗，理论上单标没有重合，混标也不会重合。

0

m3008626

第5楼2017/01/04

色素曲线现已成功做出，就是样品不好处理，熟肉制品，听说要SPE小柱，没做过还请给点经验，能发个聚酰胺SPE小柱我看看嘛？
有水有渝(xky0230699) 发表:单标都出来了，走单标时有发现保留时间一样的吗，走单标的流动相与你上面的流动相一致的吗，能把单标的图都发上来看一下吗，理论上单标没有重合，混标也不会重合。

0

nixiaolong

第6楼2017/01/04

你乙酸铵是20mmol 的吗？我做色素和你条件接近，可以分离七种人工合成着色剂，你这四个应该没问题的

0

有水有渝

第7楼2017/01/04

应助达人

看一下这个帖子：http://bbs.instrument.com.cn/topic/2773326
百度搜一下聚酰胺小柱有很多厂家与图片

0

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