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【讨论】用waters做蛋白水解氨基酸的测定前处理方法

液相色谱(LC)

  • 各位大哥:
    小弟初做蛋白质水解氨基酸,用的是waters的柱前衍生(2695—2487)accq-tag方法,效果不好,本人怀疑前处理不行。用传统酸水解(24h),是否酸度太大,是否可以中和,还有更好的前处理方法吗???需要加抗氧化的吗???愿听高论,跪求啊????
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  • flyaway

    第1楼2006/11/27

    酸一定要蒸干。
    酸水解是用的最多的一种水解方式,应该处理好就没有问题了

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  • goldendays

    第2楼2006/12/03

    我和你一样。酸水解后,我加了氢氧化钠溶液中和。
    但是打出来的样品图就是有些问题。
    我是将多肽放在裂解管内,然后再用盐酸蒸汽水解24小时。
    有没有其他方法?
    还有希望有用acquity的同行们指点一下,多肽量加多少mMol?
    我担心除了加过量多肽外,就是水解这步没走好

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  • goldendays

    第3楼2006/12/03

    蒸干应该会影响溶液里面的氨基酸的吧

    flyaway 发表:酸一定要蒸干。
    酸水解是用的最多的一种水解方式,应该处理好就没有问题了

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