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关于内标法的几点疑惑

气相色谱(GC)

  • 药典中关于甘油中二甘醇和乙二醇的测定方法如下:
    甘油中二甘醇、乙二醇的测定方法: 取本品约10g,精密称定,置25ml量瓶中,精密加入内标溶液(每1ml中含0.5mg正己醇的甲醇溶液)5ml,用甲醇溶解并稀释至刻度,作为供试品溶液;取二甘醇、乙二醇适量,精密称定,用甲醇溶解并稀释制成每1ml中含有二甘醇、乙二醇各0.5mg的溶液。精密量取5ml,置25ml量瓶中,精密加入内标溶液5ml,用甲醇稀释至刻度,作为对照品溶液。
    我的问题如下:
    1.从以上的测定方法可以看出来,供试品是取了10克待测的甘油进行出来测定的,对照品溶液中没有取10g空白甘油(不含乙二醇和二甘醇),相当于供试品基质和对照品基质不是完全相同,后者少了甘油这种物质。那么为什么不能进行标准加入法和内标法的一个联合即如下:取本品约10g,精密称定,置25ml量瓶中,精密加入内标溶液(每1ml中含0.5mg正己醇的甲醇溶液)5ml,用甲醇溶解并稀释至刻度,作为供试品溶液;取本品约10g,取二甘醇、乙二醇适量,精密称定,用甲醇溶解并稀释制成每1ml中含有二甘醇、乙二醇各0.5mg的溶液。精密量取5ml,置25ml量瓶中,精密加入内标溶液5ml,用甲醇稀释至刻度,作为对照品溶液。在计算加标的二甘醇和乙二醇标样峰面积时分别用加标后的总峰面积减去供试组的二甘醇或乙二醇的峰面积,这样不是更加能克服基体效应?
    2.很多文献上说相对校正因子只与检测器有关,那么理论上同物质不同天测试的相对校正因子是否相等?使用不同色谱柱测试的相对校正因子是否相等?采用不同升温程序时测试的相对校正因子是否相等?同样的物质在不同的基体中,在两种不同基体中测试出来的相对校正因子是否相等?求各位专家一 一帮我回复一下。谢谢!
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  • liux5201

    第1楼2017/04/18

    应助达人

    相对校正因子不受影响吧

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  • 安平

    第2楼2017/04/18

    应助达人

    一般的,基质不影响目标峰响应

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  • 安平

    第3楼2017/04/18

    应助达人

    相对校正因子不是绝对不变的,但是相对稳定

    不像外标法那样需要经常校正

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  • zzttaa

    第4楼2017/04/18

    基质在特定的情况下会影响目标峰响应的。

    安平(byron1111) 发表:一般的,基质不影响目标峰响应

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  • 安平

    第5楼2017/04/18

    应助达人

    实验为准,一般是这样的。

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  • zzttaa

    第6楼2017/04/22

    我经过几天的思考,我的理解如下:
    1.基质对内标法中相对校正因子的影响很小,我们基本忽略其影响,所以不用过多考虑基质的影响;
    2,内标法最大的特点是能克服仪器响应和人为进样产生的误差,所以测定结果比较精准,但是我们引入标准加入法后又会引入仪器响应和人为进样产生的误差的问题,这样就对内标法的精准度带来较大的误差。也就是说我们使用内标法是为了获取更精准的数据结构,但标准加入法的引用又引入新的系统误差,所以就失去了使用内标法的意义。所以就不能用标准加入法和内标法联用。以上是我的理解,不当之处敬请批评指正。

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  • 安平

    第7楼2017/04/22

    应助达人

    要看具体的分析场合。

    基质是否影响定量,需要实验来确认。
    一般的液体样品直接进样方式的分析,基质影响应该不大。

    如果是顶空,经常可以见到基质的影响。顶空最好使用标准加入法定量。

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  • zzttaa

    第8楼2017/04/22

    但在内标法中对相对校正因子的影响应该很小。

    安平(byron1111) 发表: 要看具体的分析场合。

    基质是否影响定量,需要实验来确认。
    一般的液体样品直接进样方式的分析,基质影响应该不大。

    如果是顶空,经常可以见到基质的影响。顶空最好使用标准加入法定量。

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  • 安平

    第9楼2017/04/22

    应助达人

    对的。

    zzttaa(zzttaa)发表: 但在内标法中对相对校正因子的影响应该很小。

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  • zyl3367898

    第10楼2017/04/28

    应助达人

    内标法与外标法不能同时使用,只选用一种就行。

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