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【液相色谱之家】请教大家个问题，今天早上走样品，第一针是这个样子，如图，第二针就出现倒峰了

元宵爱元宵

2017/07/28

液相色谱（LC）

问题:请教大家个问题，今天早上走样品，第一针是这个样子，第一张图，流动相是乙腈和磷酸水溶液，第二针就出现倒峰了，第二张图，看了下灯能量，第三张图，基线升到2了，平时基线很平的。
回复: 基线升到2，说明样品池(也就是柱后流出液)内的吸收很大。波长多少? 乙腈的比例是从多少升高到多少？检查仪器的波长设定值有没有错?流动相有没有配错?还有就是色谱柱的原因，将乙腈的比例提高到80%以上，先平衡色谱柱30分钟以上，再调至初始比例平衡色谱柱后，再进样测试。要么是流动相本身的吸光度很大，要么是色谱柱内有物质流出。
提问人: 好的，我换瓶新的流动相试试，谢谢大家[抱拳]。用的是全波长扫描，高波长下基线基本到0了。330nm基线就到0了。验证完毕，流动相的问题，换新的乙腈就好了，库房的色谱乙腈应该不是乙腈，搬家的时候弄乱了

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