yy_0324
第2楼2018/10/06
维生素A的测定方法:
1、原理:维生素A在三氯甲烷中与三氯化锑相互作用,产生蓝色物质,其深浅与溶液中所含维生素A的含量成正比。该蓝色物质虽不稳定,但在一定时间内可用分光光度计于620nm波长处测定其吸光度。
2、仪器实验室常用设备分光光度计回流冷凝装置。
3、试剂本实验所用试剂皆为分析纯,所用水皆为蒸馏水。
(1) 无水硫酸钠 Na2SO4;
(2) 乙酸酐;
(3) 乙醚 不含有过氧化物;
(4) 无水乙醇 不含有醛类物质;
(5) 三氯甲烷应不含分解物,否则会破坏维生素A,检查方法:三氯甲烷不稳定,放置后易受空气中氧的作用生成氯化氢和光气。检查时可取少量三氯甲烷置试管中加水振摇,使氯化氢溶到水层。加入几滴硝酸银溶液,如有白色沉淀即说明三氯甲烷中有分解产物;
(6) 25%三氯化锑-三氯甲烷溶液 用三氯甲烷配制25%三氯化锑溶液,储于棕色瓶中(注意避免吸收水分);
(7) 50%氢氧化钾溶液(KOH) W/V;
(8) 维生素A标准液 视黄醇(纯度85% Sigma)用脱醛乙醇溶解维生素A标准品,使其浓度大约为1ml相当于1mg视黄醇。临用前用紫外分光光度法标定其准确浓度;
(9) 酚酞指示剂 用95%乙醇配制1%溶液。