求助：DL-丝氨酸含量的液相检测方法或滴定法

应助达人

氨基酸，需要用衍生方法测定，或者氨基酸测定仪。

应助达人

您是怎么做的，色谱条件和样品处理方法

没有氨基酸检测仪
1、缓冲溶液制备

精密称取一定数量的四硼氢酸钠，溶解在水中，使水溶液中的样品溶度为0.05mol/L, 加2N 氢氧化钠溶液调节PH9.5,混合均匀，此溶液应当保存在4℃的条件下。
2、衍生化试剂制备
精密称取 0.3430g 邻苯二甲醛和0.1472g N- 乙酰-L-半胱氨酸, 转移到同一25ml的容量瓶中，加入5ml的无水乙醇超声直到溶解，用缓冲溶液稀释到刻度，混合均匀，应当现配现用，并避免光照。
3、样品溶液制备
精密称取0.1g样品，加入到250ml的容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，必要时进行超声。
4、仪器上进行衍生处理
5、色谱条件
仪器: Aglient 1260
色谱柱: YMC C18 250×4.6mm ID, 5μm
流速: 1.0ml/min
柱温: 30℃
波长: 334nm
6、流动相制备
(1) A相：称取4.1g无水乙酸钠加入适量水溶解，定容至1000ml，使用水系膜过滤，超声脱气。
(2) B相：乙腈：使用有机膜过滤，超声脱气。
(3) A相：B相=85:15

应助达人

OPA一般与2-巯基乙醇同时使用，OPA在2-巯基乙醇存在下与第一级氨基酸迅速反应生成1-硫代-2-烷基异叫哚

液相加柱后衍生直接解决问题，比氨基酸分析仪省好多钱，氨基酸分析仪太贵，检测原理都是一样的

您有类似的检测方法吗？

您有类似的检测方法吗？求借鉴

应助达人

重新性较差，差到什么程度，这个主要问题还是衍生不好，楼主的样品是纯物质，还是有干扰物质？用的是柱后衍生法，问一下安捷伦工程师优化一下这个衍生条件。

应助达人

类似的检测方法的文献很多，可以查一下氨基酸的测定文献