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【求助】峰面积变小,找不到原因

  • E = h·v
    2006/12/23
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 悬赏金额:10积分状态:已解决
  • 我用的是 Waters 1525泵 + 2487紫外检测器
    三天前检测过孔雀石绿,
    今天测酱油中的防腐剂,于是换了进样环,换了柱子(以前一向都是用这个进样环和柱子做防腐剂的)。

    在进了标准样后发现峰面积只有往常的一半,而保留时间正常,峰形也很好。
    换了新的流动相(5%甲醇 + 95%乙酸铵缓冲液),换了检测器的氘灯,问题还在,方法的参数没有变动过,进样环的体积也没有弄错。

    请问哪位朋友知道是什么原因会使峰面积只有正常的一半吗?
    会不会是柱子用旧了(那是用了3年的柱子)……困惑ing……

shlele 2006/12/24

你先检查流路是否有漏液,D2灯的能量是否正常(220nm),定量环?再不行就用5%的稀硝酸冲洗流路,但因把柱子拆下.

吉庆先生 2006/12/27

晕!灯挺难买的,看来你要等一段时间了!凑活用吧!添加剂检出来就是高的!检出线附近的没有,也不起什么作用,所以他们用就用挺多的!

五虎上将 2006/12/23

1,首先买三个标样,三人三平行可排除是否标样原因.2.换流动相(包括甲醇,水,乙酸胺都还新的)3.找维修工程师.4.其实楼主不必惊慌,你不必清楚它为什么变小,你只要做一套标准曲线,看看线性如何,假如线性好,继续用也没什么.

myreebok 2006/12/27

废话少说 1.检漏 2.由于长期使用,是否有缓冲盐析出,导致检测池被堵,灵敏度下降。 3.色谱柱上的理论塔板数若低于3000.换吧 4.灯,传说中的灯, 换了吧,都3年了…… 5.最小可能,定量管出了问题,堵塞或机械损坏,导致进样量小了

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  • tei7814

    第1楼2006/12/23

    灵敏度下降了。
    柱子久了保留时间会变而且峰形不好。
    应该是其他原因。

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  • gqk

    第2楼2006/12/23


    Waters机了我用过,依我的经验看,应该是定量环有问题或样品分解了.请问楼主标样是新配的?请确认该样品是否适合此流动相?换一个同体积的定量环试一下?仅供参考。。。。。。

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  • E = h·v

    第3楼2006/12/23

    样品和标样都是用水定容的,一向都是用同一种流动相,应该没问题

    标样是从高浓度的储备液中稀释再上机的,下星期会买到新的标样储备液,到时候再试试

    至于定量环,虽然有点旧,但每次上机之后都用超纯水冲洗过的,如果说环内管路堵塞导致实际体积变小……这个可能性应该不大

    gqk 发表:
    Waters机了我用过,依我的经验看,应该是定量环有问题或样品分解了.请问楼主标样是新配的?请确认该样品是否适合此流动相?换一个同体积的定量环试一下?仅供参考。。。。。。

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  • 五虎上将

    第4楼2006/12/23

    1,首先买三个标样,三人三平行可排除是否标样原因.2.换流动相(包括甲醇,水,乙酸胺都还新的)3.找维修工程师.4.其实楼主不必惊慌,你不必清楚它为什么变小,你只要做一套标准曲线,看看线性如何,假如线性好,继续用也没什么.

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  • E = h·v

    第5楼2006/12/23

    嗯,如果标准和样品的峰面积都下降一半的话,定量的时候就没问题
    只是实验室的老员工说 她做了好几年,头一次看到这样的怪事,有点疑惑,我想找出问题原因,也增长一些经验

    chenruichao 发表:1,首先买三个标样,三人三平行可排除是否标样原因.2.换流动相(包括甲醇,水,乙酸胺都还新的)3.找维修工程师.4.其实楼主不必惊慌,你不必清楚它为什么变小,你只要做一套标准曲线,看看线性如何,假如线性好,继续用也没什么.

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  • 深海的海豚

    第6楼2006/12/24

    用这根柱子做其他样品如何呢?是否也是同样的情况呢?你所说的面积减少一半会不会是仪器参数设置的原因呢?

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  • shlele

    第7楼2006/12/24

    你先检查流路是否有漏液,D2灯的能量是否正常(220nm),定量环?再不行就用5%的稀硝酸冲洗流路,但因把柱子拆下.

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  • E = h·v

    第8楼2006/12/24

    为什么不用纯水或甲醇冲洗,而要用稀硝酸冲洗管路?
    我怕硝酸对管线和泵体有腐蚀

    灯应该没问题,因为换了新的氘灯,峰面积还是只有一半

    shlele 发表:你先检查流路是否有漏液,D2灯的能量是否正常(220nm),定量环?再不行就用5%的稀硝酸冲洗流路,但因把柱子拆下.

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  • bludger

    第9楼2006/12/24

    仔细检查一下你的系统设置,如压力是否正常,检测波长是否正常,检查各处有没有漏夜等。如果以上条件都确定无误,那就要考虑标样的问题了。

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  • E = h·v

    第10楼2006/12/25

    今天新的标样到货了,结果还是一样……
    把柱子都换了,还是那样
    就差没把泵换了!

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