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关于标准曲线的几点疑惑,求解答

  • Insm_6449257f
    2018/08/16
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 各位路过的老师,本人近期需要做标准曲线,但有以下疑问,请问
    1做的时候标准曲线的每个浓度平行做3次,还是每个浓度进针3针就可以呢?
    2按照作业指导书是内标法处理样本,但是一个老师说他们样本处理是内标法,数据分析是软件上选择的外标法来计算得出结果的,请问这样是否合理可行?
    3文献上目标峰保留时间约8min,内标保留时间约11min,请问出来峰比较多比较近的情况下,如何确定目标峰?是不是用做出来的标准曲线和质控品来确定目标峰的对错?
    小白一枚,希望路过的老师指导一二。感谢!
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  • 栀子花开

    第1楼2018/08/16

    应助达人

    1.每个浓度进3针
    2.不置可否
    3.不能仅凭保留时间来确定是否为目标物。可以在提取液里加入标液,看相同保留时间的峰面积是否相应升高。

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  • sdlzkw007

    第2楼2018/08/16

    应助达人

    关于标准曲线的平行测定,个人理解就是每个浓度的标准溶液进3针取峰面积平均值作为计算的响应值;内标法的具体做法就是在标准溶液和样品溶液中加入同样的内标量,通过标准溶液与内标的峰面积比值做为计算的响应值,与标准溶液的浓度拟合出工作曲线;与外标法的区别就是峰面积比值而不是单一标准溶液的峰面积,能够通过内标物的峰面积和保留时间衡量方法的稳定性。至于保留时间定性分析主要是标准溶液与样品检测同一保留时间的峰认为是同一个物质,通过改变色谱柱对比分离结果,可以更加准确的定性分析,所谓的双柱确证。也可以在样品溶液中添加标准品,添加前后得到谱图叠加可以分析保留时间相同的峰面积同比增长,确证是与标准品同一个目标物。

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  • zyl3367898

    第3楼2018/08/16

    应助达人

    软件上也可以选择内标法。

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  • www

    第4楼2018/08/16

    应助达人

    1.每个浓度三针,取平均值做曲线。2.内标法与外标法,不同之处就是是否加内标物。内标是色谱定量里面相对最准确的一个方法,影响因素小。你说的这种情况或许结果相差不大,但这两种方法的计算不一样 3.文献上给的只是个参考。具体还要用我们的目标物质加入法,来确定保留时间。

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  • 有水有渝

    第5楼2018/08/16

    应助达人

    1标准曲线法每个浓度进两针,取平均值做标准曲线
    2应按规定使用内标法计算
    3分别进单组分标准品和内标,用保留时间定位

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  • qgp

    第6楼2018/08/17

    每个浓度进三针取均值

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  • 有水有渝

    第8楼2018/08/17

    应助达人

    看楼上很多版友都说每个浓度进3针,现在法规、标准要求每个浓度进3针吗,具体出处在哪里?

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  • m3256093

    第9楼2018/08/17

    一般标准上都有说,见校准曲线的地方,每个浓度平行进样3次,以平均峰面积定量

    有水有渝(xky0230699) 发表:看楼上很多版友都说每个浓度进3针,现在法规、标准要求每个浓度进3针吗,具体出处在哪里?

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  • Insm_6449257f

    第10楼2018/08/17

    感谢您的回复,今天因为时间问题,6个浓度,先试了一下每个瓶进两针,做出来标准曲线相关性0.99946,这样是不是说明也可以暂用呢?

    m3256093(m3256093) 发表:一般标准上都有说,见校准曲线的地方,每个浓度平行进样3次,以平均峰面积定量

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