[前处理分享]试样制备充分混匀之我想

试样制备充分混匀之我想

在化验工作中，化验时所称取的分析试样往往是几克、几百毫克或更少，而分析结果必须能代表全部样品的平均组成，因此，试样具有代表性就具有极其重要的意义。一般来说，采样误差常大于分析误差，如果采样和制样方法不正确，即使分析工作做得非常仔细和正确，也是毫无意义，在农产品农残的检测中关于试样制备也同样要求充分混匀。
一、不同以往的能力验证
NY/T761-2008蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定方法中制备样品要求按GB/T8855抽取蔬菜、水果样品，取可食部分，经缩分后，将其切碎，充分混匀放入食品加工器粉碎，制成待测样。放入分装容器中，于-20℃∽-16℃条件下保存，备用。标准中要求对试样充分混匀，但充分混匀的具体方法没有详细说明。在我单位刚刚结束的2018年河南省农产品质量安全检测技术能力验证中，因试样前处理过程中的充分混匀问题给我们的能力验证工作带来了很多困扰，为了圆满完成能力验证工作，我们想尽了各种解决办法，现分享给大家，敬请指正。
10月9日上午张工从省农产品质量安全检测中心领回了盲样样品A14(苹果，经我们与多个苹果品种比较，确定该苹果样品属于苹果中的花牛苹果)和B28（西葫芦），需要对样品中的90多种农药进行定性定量检测。进过3个多小时的解冻，我们于下午三点半开始盲样样品的前处理工作。
充分混匀样品是正确前处理的第一步，也是能否顺利完成这次能力验证的关键点之一。今年的盲样样品与往年不同，盲样的充分混匀工作更是重中之重。
1、苹果作为基质第一次参加能力验证
B28是待测西葫芦样品，西葫芦是葫芦科南瓜属的一种，皮薄肉厚、汁多便于混匀。
A14是苹果样品，苹果的果实属于仁果类，含糖量高，破碎以后汁液少、皮多渣多，特别粘稠，特别是省站选的花牛苹果更是面甜水分少，制备后的基质黏稠度更强。

2、发放样品的数量和盛放的容器改变

往年的省农产品质量安全检测技术能力验证都是每个正好用于检测的25g样品盛放在分装容器离心管中，小容器储存，然后加标冷冻保存发放给各检测单位， 各检测单位领取盲样后充分解冻后就可直接加乙腈匀浆分离。今年的能力验证加大了难度，盲样样品是用于气相、气质、液相等分别检测的样品共200克盛放在一个大的分装容器中加标冷冻保存，各检测单位在检测前还需进行多个25g的分装工作，此时的是否充分混匀决定了试样是否具有代表性，分析结果能否代表全部样品的平均组成。

二、千计百谋、殚精竭虑

面对具有一定难度的挑战，我们实验室检测人员一致认为应付、回避不是我们的态度，发现问题、解决问题、挑战自我是我们追求的目标，为了充分混匀样品我们发挥了集体智慧。

（一）用温水再次将样品充分解冻。

样品的充分解冻是实现混匀的前提。

（二）用勺子充分搅拌。

（三）用AK旋涡混匀器长时间混匀

（五）用勺子再次充分搅拌

（六）用替代品（自备苹果）尝试用匀浆机混匀。

匀浆机以其高速（每分钟12000转）稳速的优势应是混匀样品的首选，但这次样品是大容器盛放，苹果样品还特别粘稠，在不能提前稀释的情况下进行匀浆，匀浆机头和匀浆杆壁粘附太多，样品流失太多，对盲样的考核有多大的影响我们在不知道的情况下（在后面的25g样品加入50ml乙腈稀释后再匀浆还会出现机头机壁粘附很多样品的情况），没敢贸然使用。我们取来了用于和省站盲样样品进行比对的提前自己制备的装在相同的容器中的200g苹果样品，用匀浆机进行混匀。

用替代样品尝试匀浆机匀浆失败后，我们放弃了用匀浆机混匀样品的办法。

在采用了多种混匀方法和正确的后续处理后，我们的盲样样品在大家的期待中定性定量结果测定出来，B28西葫芦的两个平行样平行特别好，A14苹果的两个平行样品结果不满意，再对苹果样品取平行样进行重新测定，结果还是不理想。我们研判出现这样的结果主要还是因为①苹果这个基质的黏稠度大，混匀环节没有做到充分②过滤环节因残渣太多太硬，最后的残渣挤压过程往往造成滤纸破损，滤纸不能全部包裹残渣，残渣挤压不能充分。

三、总结

能力验证工作所说结束了，但关于这次能力验证工作我思考了很多，也查阅了不少前处理过程中的样品制备和混匀方面的资料，收获满满但困惑还在，关于像苹果之类粘稠基质的样品的检测技术我还待提高和解决，但我有信心和决心，经过我们团队下一步的探索，这个问题一定会有一个圆满的结果，敬请期待。