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液相色谱一个小问题又是很新鲜的问题，各位大佬进来看看哈

磁场线

2018/10/28

液相色谱（LC）

最近做液相遇到个问题：流动相是50:50的乙腈和0.5%乙酸水（2个瓶子哈，用的二元泵），我为了让保留时间往前走一点，然后我单独往0.5%乙酸水的瓶子里加一定量乙腈（说明一下，我们两个瓶子比例不能改的，就只能这样了），结果遇到2个问题：1、保留时间飘来飘去 2、同一个溶液2针峰面积差的挺多
峰飘来飘去，保留时间不定，我自己觉得可能有问题的是：二元泵、流动相本身。二元泵我不知道是不是有问题，因为其他同事做都好好的啊，那就是流动相了，自己也觉得这个操作有点怪：一个瓶子里装的乙腈，然后另一个瓶子里往乙酸水里又加乙腈，这样会不会在色谱柱里面，两个瓶子里乙腈作用不均匀（我这里说不均匀，是因为装纯乙腈的瓶子肯定没问题，但是另一个瓶子里的乙腈进入色谱柱后，遇到另一个瓶子里纯乙腈后就可能离开乙酸水而导致分配总是很乱），导致时间飘来飘去。
同一个溶液2针峰面积差的挺多，这个又是怎么回事，搞不懂，请各位大佬指教。

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第1楼2018/10/28

应助达人

首先，以前乙酸水里加乙腈之前的流动相，保留时间波动大吗？如果也是如此。考虑下在线脱气机的问题

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检测老菜鸟

第2楼2018/10/28

应助达人

只想问加水之后混匀脱气没？

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黑色豆子

第3楼2018/10/29

应助达人

水相加完乙腈之后是否有混匀的步骤？
流动相变化之后，柱子是否平衡好？
峰面积大小变化这样不算大吧

0

dadgoh

第4楼2018/10/29

应助达人

应该时流动相不均匀所致。

0

有水有渝

第5楼2018/10/29

应助达人

压力稳定吗，保留时间的波动我觉得还可能接受，如果是自动进样，峰面积波动有点大。如果不是走的梯度洗脱，直接的把流动相预先混合好再试一下，如果恢复正常，可能是通道不适合使用纯乙腈。我觉得往乙酸水相里加一点乙腈不会混合不均匀，也不会导致保留时间漂移、峰面积不稳定

0

Insm_6a67fa0b

第6楼2018/10/29

不懂

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夏天的雪

第7楼2018/10/31

应助达人

测试一下加乙腈前后的ph值，可能是ph变了，缓冲能力下降了，还可能就是气泡问题

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sdlzkw007

第8楼2018/11/02

应助达人

分明是加乙腈的乙酸水流动相不均匀造成的。添加了乙腈的乙酸水流动相充分混匀后超声试一下吧

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磁场线

第9楼2018/11/06

脱了，使劲摇的，然后超声10分钟
检测老菜鸟(v3295053) 发表:只想问加水之后混匀脱气没？

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磁场线

第10楼2018/11/06

好像没有专门观察过啊，我只是问同事他之前用的时候稳不稳，他说挺稳的啊
www(cxm2009) 发表:首先，以前乙酸水里加乙腈之前的流动相，保留时间波动大吗？如果也是如此。考虑下在线脱气机的问题

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