液相色谱流动相配置

应助达人

第一个问题，没测过这个化合物，你按这个方法可以试试，我建议直接以加TFA的水相、乙腈作为流动相，在测试之前要用乙腈溶一下目标物，看看溶解度。
第二个问题，随便什么通道都可以
第三个问题，加酸调调PH，最简单的，酸加酸。

您说的调pH，是调节流动相还是样品

应助达人

第一个问题：您查到的苯甲酸的方法是什么方法，有机相比例太大了吧？5009.28-2016的标准里，用250的长柱，甲醇的比例也才是5%。
第二个问题，2%的乙酸铵缓冲液和水是放在一起的，为什么要分开？盐溶液放在哪个通道，可以按照你日常的操作习惯和仪器的使用习惯。这样不会混乱。
第三个问题，只有乙腈水的话，响应可能会小很多。可以加一些甲酸，尝试一下。

这个方法是别人文献里写的，所以我也不知道它的有机相比例，但是有机相比例小的话，基线不是很难走平吗

应助达人

方法适合不适合，试了才知道。最好紫外扫描下，最大吸收波长。
如果你就等梯度，一个泵也可以，先把溶液混合均匀。选择流动相和柱子也有关系的，看看你现有的柱子，再问问厂家有没推荐的方法。

我用乙腈和水20比80，波长230nm测的标准物质，什么峰都没有，所以才有点困惑，接下来我打算再扫一下紫外的全谱，确定一下230nm附近是否有最大吸收，如果是，我再改变一下流动相配比可以吗

应助达人

我想用液相测定2－溴苯甲酸，但是只查到了苯甲酸的测定方法，它的流动相是81%的水，17%的乙腈，2%的乙酸铵缓冲液用冰醋酸调节pH为4.2
第一个问题，我可以用这个方法来测吗？
答：可以用这个方法来试，你的色谱柱是什么规格的，建议用50%的水（0.05%磷酸溶液，pH测一下最好在2.0-3.0之间）-50%的乙腈为流动相试起，不要用盐溶液。最好用流动相溶解一个样品，配制成0.1mg/mＬ的溶液，用紫外扫描一下，看一下最大吸收波长在哪里，液相的检测波长就设置为最大吸收波长
第二个问题，用这个方法是不是一定要是四元泵，三种流动相怎么分通道，盐溶液一定要用A通道吗？
答：可以不需要多通道，直接预先把流动相混合在一起，如果有多通道最好，一个通道放0.05%磷酸溶液，一个通道放纯乙腈，可以调节任意的流动相比例
第三个问题，如果我不用盐溶液，流动相只有乙腈和水，是不是测不出来啊？
答：也会测出来，但峰形可能不好。

我的流动相用的纯的乙腈和水，比例是20：80，没有出峰，因为考虑流动相有机相比例太少，是不是难以讲2－溴苯甲酸从色谱柱上冲下来，就把流动相比例换成了乙腈和水80：20，结果还是没有峰，这是为什么呀？？？

应助达人

我可以大胆的告诉你，可以试，但是一般这么复杂的流动相，我的直觉会告诉我先排除掉，我发一篇测苯甲酸的文献给你，你参考参考，等度洗脱的方式。