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硒代氨基酸的前处理问题

Insm_da428e89

2018/11/29

前处理综合讨论

求助各位大佬，本人在做植物中硒代氨基酸的提取，但由于样品基质严重，采用固相萃取法进行氨基酸的净化，但实验发现硒代氨基酸标样经固相萃取后无法有效回收，之前用pax进行净化，用的4%氨水过样，5%甲酸洗脱，回收率偏低，用甲酸溶液洗涤后硒代氨基酸回收率提高到90%左右，但过样还是不行，又加了一个pcx柱进行联用，先用5%甲酸过样，4%氨水洗脱，再过pax发现回收率降低到了50%，pcx同样也用甲酸洗涤后回收率会提高，但回收率就是在50%左右，实验发现问题出在pcx上，5%的甲酸可以让目标物完全挂在柱子上，并且pax的流程验证过没有问题，所以问题出在pcx上，现在的问题是，无论我减少目标物浓度，还是加大洗脱体积或者氨水浓度都没有改善，求个位大佬给点建议，非常感谢

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检测老菜鸟

第1楼2018/11/29

应助达人

我先抛个砖，提两个问题，第一，用甲酸溶液洗涤后硒代氨基酸回收率提高到90%左右，但过样还是不行？过样仍无法减小样品基质的影响？
第二，为什么会选pax和pcx柱联用，它们一个主要用于酸性化合物，一个主要用于碱性化合物，在选柱上是怎么考虑的？

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Insm_da428e89

第2楼2018/11/29

对的，先是用纯标样进行条件摸索，但是过样就不行了，考虑样品中有机酸等阴离子的干扰才考虑用pcx_pax联用，pcx是用来打算去除有机酸等阴离子
检测老菜鸟(v3295053) 发表:我先抛个砖，提两个问题，第一，用甲酸溶液洗涤后硒代氨基酸回收率提高到90%左右，但过样还是不行？过样仍无法减小样品基质的影响？第二，为什么会选pax和pcx柱联用，它们一个主要用于酸性化合物，一个主要用于碱性化合物，在选柱上是怎么考虑的？

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