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标准品做线性过程中,出现宽峰,难分离双峰。

液相色谱(LC)

  • 最近用标准品做线性,浓度为0.5mg/ml这样,进样量为2ul,4ul,8ul,12ul,16ul这样进到8ul时还正常,进样到12ul时峰变宽变胖,进样16ul时,出现劈叉峰……很丑……看着挺像柱子过载,

    但是呢!!平时我们进样量是10ul,一切正常,也有比这个浓度高的时候……峰响应值甚至能达到1800mv还保持正常峰形……这次怎么进样12ul,16ul就跑偏了,愁……

    还有一个如何判断柱子的进样过载情况,不是出现了奇怪的峰才发现,而是进样到什么样的浓度可能出现过载情况,如何一开始就能判断,用什么样的方式,还是说柱子过载也跟不同样品流动相都有关系……出来了才晓得???

    以下附图
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  • m3116636

    第1楼2018/12/07

    图有点糊,不过还是可以看出峰形……将就着看吧(╯°Д°)╯︵┴┴

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  • lavinia

    第2楼2018/12/07

    应助达人

    标品的溶剂是什么,流动相是什么,进样量大了对流动相的配比是不是产生了影响

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  • 检测老菜鸟

    第3楼2018/12/07

    应助达人

    这个不像是过载,不过可以减小进样量看下峰型,另外也不用执着于这个点吧,平常样品浓度是多少,曲线做到覆盖就行了。

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  • m3116636

    第4楼2018/12/07

    溶剂是乙醇,流动相是4%冰醋酸,乙腈。52-48等梯度,一直这么做没太大问题,但是平时稀释倍数是1250倍进样量10ul,这次是500倍,进样量分别2.4.6.8.12.16ul,进样10ul正常,12ul 开始变胖,16ul就这样了

    lavinia(lavinia) 发表:标品的溶剂是什么,流动相是什么,进样量大了对流动相的配比是不是产生了影响

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  • m3116636

    第5楼2018/12/07

    减小到10ul是正常滴,但是平时也是10ul,做线性选择了2.4.6.8.12.16……然后12.16就变大胖峰了(●—●)

    检测老菜鸟(v3295053) 发表:这个不像是过载,不过可以减小进样量看下峰型,另外也不用执着于这个点吧,平常样品浓度是多少,曲线做到覆盖就行了。

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  • 检测老菜鸟

    第6楼2018/12/07

    应助达人

    跟你的柱子还有检测器都有点关系,没找到原因,就没法定解决方法,两个方案,一个是换根柱子,哪出问题解决哪,一个是,就这样,线性没问题的话,走样品相当的标准品,能行就正常

    m3116636(m3116636) 发表:减小到10ul是正常滴,但是平时也是10ul,做线性选择了2.4.6.8.12.16……然后12.16就变大胖峰了(●—●)

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  • dadgoh

    第7楼2018/12/07

    应助达人

    减小进样量,估计是过载了。

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  • sdlzkw007

    第8楼2018/12/07

    应助达人

    不得不说你们的偷懒做法有点儿问题。首先是进样量一致有助于标准曲线和检测,否则有可能测试结果出现问题。

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  • m3116636

    第9楼2018/12/07

    嗷嗷嗷,咋说呢,这种方法各公司用的还不少(╯°Д°)╯︵┴┴,不过用稀释的方法在之前,也做过了,挺好的。这次是标准品剩余不多,但是项目还有很多(●—●)

    sdlzkw007(sdlzkw007) 发表:不得不说你们的偷懒做法有点儿问题。首先是进样量一致有助于标准曲线和检测,否则有可能测试结果出现问题。

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  • m3116636

    第10楼2018/12/07

    是的,做样品但是还是好做的,不影响,找出原因是重点~但就是这个原因不好找

    检测老菜鸟(v3295053) 发表:跟你的柱子还有检测器都有点关系,没找到原因,就没法定解决方法,两个方案,一个是换根柱子,哪出问题解决哪,一个是,就这样,线性没问题的话,走样品相当的标准品,能行就正常

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