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用到0.1%的TFA作为流动相时，起始比例较高会有影响吗？

m3116636

2019/03/28

液相色谱（LC）

具体是这样，最近研发人员呢提出分析方法时间过长，出峰时间很晚，基线偏移严重，提出要求优化一下。
流动相用的是0.1%TFA和乙腈，检测波长210nm柱温30摄氏度，梯度为0-20分钟由比例由B20%升到85%，22分钟到95%，30分钟95%，之后回到初浓度35分钟结束

主峰出峰时间在21-27分钟之间，峰高1000，漂移300-500。
漂移我是怀疑柱子没冲洗的问题。
然后呢我想直接把初浓度提到50%，因为在十几分钟基本没有目标峰。
但是没有怎么看到初浓度这么高的方法，如果我提到50%可能会造成什么影响？会导致基线不稳吗？那如果我把A直接配成0.1%磷酸：乙腈50：50 的比例，然后再走梯度，会改善吗？
还是有其它更好的方法呢，望指教！(╭??????)╭?

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sdlzkw007

第1楼2019/03/28

应助达人

可以试一下，理论上不会有问题；梯度洗脱通常基线都会漂移

0

检测老菜鸟

第2楼2019/03/29

应助达人

起始比例可以不用改，80%出峰在20多分钟的话，可以把第一段的程序定到十分钟以内。

0

m3116636

第3楼2019/03/29

主要是走梯度本身就会漂移，如果所短时间的话，基线漂移会不会更严重？
检测老菜鸟(v3295053) 发表:起始比例可以不用改，80%出峰在20多分钟的话，可以把第一段的程序定到十分钟以内。

0

检测老菜鸟

第4楼2019/03/29

应助达人

基线漂移正常啊，只要出峰位置变化慢，目标峰不受影响就可以了。
m3116636(m3116636) 发表: 主要是走梯度本身就会漂移，如果所短时间的话，基线漂移会不会更严重？

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