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液相问题交流

fanys10

2019/05/16

液相色谱（LC）

某同学在色谱分析前要配置流动相甲醇-水（40:60）1000ml，他用1000ml量筒，有时量取400ml甲醇，然后直接加从纯水机接出的水到1000ml，有时先量取600ml上述纯水后，再加甲醇至刻度，但此后均轻轻晃动几下量筒后即将约500ml溶液倒入储液瓶中，并开机进行色谱柱的平衡，在后续色谱条件优化中，发现“流动相中甲醇比例越高，保留时间越长”，以及“相同流速的情况下柱压虽较稳定，但只要一换流动相就明显不同”的怪异现象。请指出该同学操作中的不正确或不规范之处，并解释这两个现象可能的原因。

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有水有渝

第1楼2019/05/16

应助达人

1、两种配制方法有一定差异的，一般是哪一个后加哪一个的量就会稍大一些，但这个差异一般不会造成分析问题。
2、轻轻晃动几下量筒后即将约500ml溶液倒入储液瓶中，并开机进行色谱柱的平衡：没有流动相的过滤与脱气步骤吗？
3、发现“流动相中甲醇比例越高，保留时间越长”：色谱柱填料是什么类型的，分析的是什么物质？
4、“相同流速的情况下柱压虽较稳定，但只要一换流动相就明显不同”：相同流速，不同流动相组成，液体的粘度是不一样的，粘度越高压力就越大

1

hujiangtao

第2楼2019/05/16

应助达人

流动相比例不一样会造成保留时间漂移

0

welewolf

第3楼2019/05/16

应助达人

流动相配完要先超声脱气，然后再在线脱气机拍气泡
有机相越高保留越强，你应该用的是hilic柱吧

0

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