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分离纯化天然植物蛋白

lay1407

2019/05/31

液相色谱（LC）

我在做天然蛋白的分离纯化，用的是C18色谱柱，基本上前10分钟就以及完全出峰，记得目标峰最好不要在前10分钟的，有什么解决办法吗？
检测波长是215、254和280，是不是280就可以了，可是我的蛋白在280响应很低，远比不上215，215分离效果又不好，还有倒峰；
用C18制备柱收集馏分并透析冻干后，无法复溶，有什么办法在不使蛋白变性的情况下使其复溶的吗，我后面要做活性鉴定的，十分感谢

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senke

第1楼2019/05/31

应助达人

前10分钟跑完全部峰，你考虑跑过电泳么？看看分子量的范围，或者是不是没有加TFA
有没有做全波长扫描？看看峰主要在哪边
很难复融，如果不做结构鉴定，就是只做下生物活性你可以考虑加buffer,好像叫SD之类的

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