薄层色谱血竭鉴别（3）样品处理注意事项

薄层色谱血竭鉴别（3）样品处理注意事项

小序：在没有自动点板仪的情况下，点板对技术人员的要求是比较高的，经过多次训练，点出来的板不比仪器点的差，实验中也会发现很多问题，并积累一定的经验。

【1】通过多组实验发现样品振摇后加稀盐酸，所有血竭样品都会有黄色沉淀，但并不是所有血竭都能凝成棕黑色树脂状物，有的没有树脂状物出现，离心去沉淀继续试验，放置时间2-3h保证棕黑色树脂状物出现完全。

图一为三个有棕黑色树脂状物出现的样品薄层色谱图，图二为未出现棕黑色树脂状物的样品薄层色谱图，通过图一图二发现是否出现棕黑色树脂状物对色谱图实验结果影响并不明显（图一1点由于产地及加工工艺不同，存在含量多少差异，部分斑点不太清晰，但均存在；样品和对照药材点样量为10-20μL）。
【2】加20%氢氧化钾溶液10mL，研磨，（图四）加三氯甲烷5ml振摇提取，提取液点板，（图三）加三氯甲烷1ml振摇提取，提取液点板。

图三加三氯甲烷1mL,样液浓度增加，样品斑点颜色较清晰，而图四加三氯甲烷5mL，样品点颜色较浅，可能干扰结果判断。由于鉴别（3）主要鉴别血竭红素，而血竭红素含量低，增加浓度更能突出血竭红素的斑点。

【3】加三氯甲烷振摇提取，三氯甲烷层颜色呈淡红色，静置五分钟，三氯甲烷层颜色更深，提取更完全，样品斑点更清晰。

图五是加过三氯甲烷振摇后直接取三氯甲烷层点板，发现三氯甲烷层颜色较浅，样品斑点较浅。图六是加过三氯甲烷振摇后，静置五分钟后，发现三氯甲烷层颜色较图一颜色深，且斑点较清晰。