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如何选择制备柱

  • 1004133287
    2019/09/18
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • waters 4000的制备液相,需要制备5-10mg的杂质进行NMR,怎么选择制备色谱柱呢?分析用的菲罗门的C18柱,250*4.6mm,5um的。现在制备液相上的柱子是C4的,250*15mm的,我是否可以买一根250*15mm的C18柱用于样品制备呢?不知道这样的柱子上样量多少。求大侠指导,不胜感激。
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  • 小卡

    第1楼2024/09/19

    在选择制备色谱柱时,可以考虑以下几点:

    **一、考虑因素**

    1. 分离需求:
    - 分析用的 C18 柱如果能较好地分离目标杂质,那么选择 250?15mm 的 C18 制备柱是比较合理的尝试。C18 柱通常对大多数非极性和中等极性的化合物有较好的分离效果。
    - 考虑杂质的性质,如极性、分子量、结构等。如果杂质与目标物的性质差异较大,C18 柱可能提供更好的分离选择性。

    2. 上样量:
    - 250?15mm 的制备柱一般比分析柱具有更大的上样量。具体上样量取决于柱子的规格、填料性质、样品性质以及分离要求等因素。通常可以通过查阅柱子的说明书、咨询厂家或参考类似应用的经验来初步确定上样量范围。
    - 一般来说,对于这种规格的 C18 制备柱,上样量可能在几十毫克到几百毫克甚至更高,但需要逐步摸索以确定最佳上样量,避免过载导致分离效果下降。

    **二、操作建议**

    1. 方法开发:
    - 在使用新的制备柱之前,先进行方法开发。可以使用小量的样品进行试验,优化流动相组成、流速、梯度等条件,以实现对目标杂质的良好分离。
    - 监测分离效果,确保杂质与其他成分有足够的分离度,以获得高纯度的杂质样品用于 NMR 分析。

    2. 注意事项:
    - 制备过程中要注意样品的溶解性和稳定性,选择合适的溶剂溶解样品,并确保在制备过程中样品不会发生降解或变质。
    - 定期对制备柱进行维护和清洗,以延长柱子的使用寿命和保持良好的分离性能。

    总之,选择 250?15mm 的 C18 制备柱是可行的尝试,但需要进行方法开发和优化,以确定合适的上样量和分离条件,确保获得足够量的高纯度杂质用于 NMR 分析。

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