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第1楼2024/09/19
在选择制备色谱柱时,可以考虑以下几点:
**一、考虑因素**
1. 分离需求:
- 分析用的 C18 柱如果能较好地分离目标杂质,那么选择 250?15mm 的 C18 制备柱是比较合理的尝试。C18 柱通常对大多数非极性和中等极性的化合物有较好的分离效果。
- 考虑杂质的性质,如极性、分子量、结构等。如果杂质与目标物的性质差异较大,C18 柱可能提供更好的分离选择性。
2. 上样量:
- 250?15mm 的制备柱一般比分析柱具有更大的上样量。具体上样量取决于柱子的规格、填料性质、样品性质以及分离要求等因素。通常可以通过查阅柱子的说明书、咨询厂家或参考类似应用的经验来初步确定上样量范围。
- 一般来说,对于这种规格的 C18 制备柱,上样量可能在几十毫克到几百毫克甚至更高,但需要逐步摸索以确定最佳上样量,避免过载导致分离效果下降。
**二、操作建议**
1. 方法开发:
- 在使用新的制备柱之前,先进行方法开发。可以使用小量的样品进行试验,优化流动相组成、流速、梯度等条件,以实现对目标杂质的良好分离。
- 监测分离效果,确保杂质与其他成分有足够的分离度,以获得高纯度的杂质样品用于 NMR 分析。
2. 注意事项:
- 制备过程中要注意样品的溶解性和稳定性,选择合适的溶剂溶解样品,并确保在制备过程中样品不会发生降解或变质。
- 定期对制备柱进行维护和清洗,以延长柱子的使用寿命和保持良好的分离性能。
总之,选择 250?15mm 的 C18 制备柱是可行的尝试,但需要进行方法开发和优化,以确定合适的上样量和分离条件,确保获得足够量的高纯度杂质用于 NMR 分析。