液相色谱找方法

应助达人

目标物会醇解，流动相不能用甲醇，只能用乙腈。想要增加保留，可在流动相中加入一定比例盐或酸，一是调节流动相PH，起到缓冲作用，延长目标物保留时间。二是抑制其他弱酸性物质的电离，主要让目标物以一种形式存在，当然前提先要知道目标物的PKa ,使流动相PH低于PKa-2.

如果你是研发的新样品，是单一样品还是混合样品，物质是否还有其它性质，易水解和醇解，醇解和水解的速度快不快，是在pH高时快还是低时快，有没可能找到一个相对稳定的状态。如果找到了，可考虑用少量水，比如5%的水试试。无法完全分离开，大多也是因为流动相溶剂强度不合适。既然易水解，是否有考虑用正相系统，正己烷和乙酸乙酯作为流动相来进行分离，可能有更好的效果，或者采用正己烷、乙酸乙酯、四氢呋喃三相作为流动相分离。如果只有反相可以用，想要分的更开，降低流速，选择更长的柱子，前处理选择更好的溶剂，找到更合适的紫外波长。毕竟是你们自己配置的新样品，只有你们自己知道里面有什么，还有配个PDA检测器进行纯度分析。

忘了说了 还可以采取梯度洗脱

应助达人

强烈推荐试一下正相色谱柱分离情况。

应助达人

楼主说的水解是不管酸碱下都容易水解吗，如果不是那只要有机相用乙腈或四氢呋喃，水相用不水解的成分就可以，如果是都会水解，那建议就监测原料的消耗情况或水解产物，或者干脆跳过这一步的监测，监测下一步产物质

应助达人

比较难啊。试试别的柱子吧，不一定非得C18，保留机理不同的也试试。氰基柱，苯基柱等等。

是都易水解，这一步监测比较关键，因为原材料是消耗完了，但是不知道是否生成了目标产物，，您说的监测水解产物，是给它一定的反应条件使它完全水解后的水解产物吗？根据水解产物的含量来推算目标产物吗？