果蔬中氨基甲酸酯类农药多残留的测定小结

果蔬中氨基甲酸酯类农药多残留的测定小结

氨基甲酸酯类农药残效小、选择性强、对人畜毒性较低，在农业病虫害防治上应用广泛, 但因其有致畸和致癌作用，所以果蔬中的氨基甲酸酯类农药残留检测至关重要。目前蔬菜、水果中氨基甲酸酯类农药残留检测方法主要有气相色谱法（GC）、气相色谱-质谱法（GC-MS）、高效液相色谱法（HPLC）和液相色谱-质谱法（LC-MS）等。其中柱后衍生的高效液相色谱法（HPLC）因方法简单、检出限低而被农业部列为该类农残的标准检测方法（《NY/T761-2008蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定》）。现将测定步骤总结如下。

一、试剂、材料与仪器设备

（一）试剂（如无特殊说明为分析纯试剂，水为一级水）：乙腈（色谱纯）、丙醇（色谱纯）、甲醇（色谱纯）、氯化钠、柱后衍生试剂为pickering公司提供（包含邻苯二甲醛，OPA，巯基乙醇、OPA稀释剂和氢氧化钠溶液）、农药标准品购自农业部环境保护科研监测所（100μg/mL）（见表1）。

表1：10种氨基甲酸酯类农药及其代谢物标准品

（二）材料：新鲜黄瓜样品、固相萃取柱（氨基柱，Aminopropyl,容积6 mL，填充物500mg）、滤膜0.2（um,0.45μm,溶剂膜）。

（三）仪器设备

液相色谱仪(Agilent 1260高效液相色谱仪（二元泵），配荧光检测器（FLD），柱后衍生系统为美国科学系统公司的斯威特柱后衍生系统双通道 PCR-2型)、匀浆机、振荡器、氮吹仪及分析实验室常用设备。

二、按标准要求建立方法，设置色谱条件

按《NY/T761-2008蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定》的要求建立进样方法，设置色谱条件。

表2：溶剂梯度与流速

柱后衍生：0.05mol/L氢氧化钠溶液，流速0.3mL/min，水解温度100℃；OPA试剂，流速0.3mL/min，衍生温度室温度。

三、单标进样，确定农药出峰顺序

配制单个农药标准溶液，根据各农药的性质，逐一确定各农药出峰时间、出峰顺序，且峰面积、峰高响应良好。如峰面积、峰高响应不好，可调节溶剂梯度与流速改善。

将表1中的10种氨基甲酸酯类农药及其代谢物标准品各取1 mL置与10 mL容量瓶中，用甲醇稀释至10.0μg/mL。再分别稀释成0.1μg/mL单标，按一定顺序进样，记录出峰时间，排列出峰顺序。

四、混标进样，绘制校准曲线

配制的混合标准工作溶液注入高效液相色谱仪进行测定，各农药分离度好，峰面积、峰高响应良好。以质量分数为横坐标、相应的峰面积为纵坐标，线性回归得10种氨基甲酸类农药的标准曲线方程、相关系数和检出限如表3所示，结果显示：10种氨基甲酸酯类农药在0.05-0.5mg/Kg范围内线性良好，相关系数除涕灭威亚砜为0.9975外，其它均为1.0，检出限为0.001-0.007mg/Kg，满足农药残留定量分析要求。

表3：10种氨基甲酸类农药残留的回归方程、相关系数和检出限

五、样品进样及结果处理

样品前处理按《NY/T761-2008蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定法》中进行操作，将净化后的样品注入液相色谱仪中，以保留时间定性，以样品溶液峰面积与校准溶液峰面积比较定量。

六、柱后衍生需要注意的问题

简单说衍生就是将不能分析的样品通过衍生化试剂反应转化为可分析的化合物。氨基甲酸酯类农药的柱后衍生根据其原理，需要注意以下问题：

1、选择合适的C18柱，才可使各个农药有效的分离。

2、水解试剂和衍生试剂不可以弄错，如果反了则无法衍生。

3、反应试剂的流速一定要稳定，反应池的温度控制也一定要稳定。

4、盛放柱后衍生试剂的反应瓶应用甲醇彻底清洗，并用甲醇清洗浸在反应试剂中的管线。反应瓶用前用甲醇浸泡一周以上。

5、甲醇水洗液3-5天要更换。

6、水解试剂不建议自己配制，我试了几次很难得到足够纯度的NaoH。

7、进样结束后要清洗系统。先把衍生试剂换成水冲洗管路30分钟，再将水换成甲醇+水（20+80）溶液冲洗30分钟，反应池温度应小于60℃。