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用缓冲盐做流动相的时候，梯度如何设置？

提莫酱爆小蘑菇

2020/08/19

液相色谱（LC）

如题：

最近做一个胺类盐酸盐，里面有个杂质是盐酸二甲双胍，我用了0.005mol/l的磷酸二氢钾，PH=3.0的水相和乙腈作为流动相，

设置梯度运行，但是梯度已经设置的很缓了，基线还是不平稳……

之前也有设置过类似的梯度，唯一不同的就是水相里面盐浓度高一些，还加了5%的乙腈……梯度也是平缓的。

以下梯度和基线图：

梯度：0 4 14 20 20.01 30

5% 5% 65% 65% 5% stop

之前设置的比这斜率大多了，都没什么问题，此次不知道哪里出了问题，左边峰高大约是50mv

分
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言逊

第1楼2020/08/20

应助达人

磷酸盐-有机相，平衡本身会需要一段时间，楼主还是梯度洗脱，是否考虑等度洗脱能达到目的？

0

有水有渝

第2楼2020/08/20

应助达人

首先盐浓度不高，你上面走的是空针梯度、空白梯度还是样品，先检查所用的试剂是不是没有问题，梯度设置是不是如你所说的。

0

提莫酱爆小蘑菇

第3楼2020/08/20

梯度洗脱，因为产物出峰早，但是可能还有别的杂质，如果等度的话，要么产物出峰很早，要么杂质不出峰
言逊(Insm_220b9c52) 发表:磷酸盐-有机相，平衡本身会需要一段时间，楼主还是梯度洗脱，是否考虑等度洗脱能达到目的？

0

提莫酱爆小蘑菇

第4楼2020/08/20

没问题，走的是空白梯度，梯度设置确实如我所说
有水有渝(xky0230699) 发表:首先盐浓度不高，你上面走的是空针梯度、空白梯度还是样品，先检查所用的试剂是不是没有问题，梯度设置是不是如你所说的。

0

有水有渝

第5楼2020/08/22

应助达人

走空针看看，就是不进样或进0ul然后运行梯度采集基线情况
提莫酱爆小蘑菇(m3116636) 发表: 没问题，走的是空白梯度，梯度设置确实如我所说

0

言逊

第6楼2020/08/31

应助达人

多走几针空白，看看趋势是不是一样
提莫酱爆小蘑菇(m3116636) 发表: 梯度洗脱，因为产物出峰早，但是可能还有别的杂质，如果等度的话，要么产物出峰很早，要么杂质不出峰

0

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