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如何解决LC-MS/MS出峰时间改变？

歪果仁zZ

2020/08/23
Joy in share

液质联用（LCMS）

如何解决LC-MS/MS出峰时间改变？

在仪器社区经常会遇到版友提问，“我的液质峰经常变化怎么办”、“每一针色谱峰随着进样往后变出峰时间问题出在了哪里”等等，今天我们为大家总结上述共性问题的解决方案。首先明确，此类问题在其他检测器上也会发生，不止出现在质谱检测器，因此基本没有必要考虑检测器的问题，排查检测器的故障。

“乙腈：缓冲液（20mmol乙酸铵0.1%甲酸）7：3，柱子：allure pfpp 5um 100x2.1mm，连续进样，目标物出峰时间后移。”我们首先分析这个版友的色谱条件，水相中添加了20 mM乙酸铵、0.1%甲酸，水相中盐类浓度稍高，配制前需要将大浓度乙酸铵超声处理，再配制20 mM乙酸铵水相，也需要长时间超声处理。再看有机相比例，70%乙腈，这种高有机相的色谱条件，当含有20 mM乙酸铵的水相，遇到大比例的有机相乙腈，盐类易产生析出现象，从而影响色谱柱内流动相的真实pH。此时我们一般不建议使用这样敏感的色谱条件，因为众所周知，添加盐类的目的是保证峰形，也是为了缓冲流动相的pH，使其更符合目标物的pKa，做到目标物以同一种形态出峰。

而此时如果不想更改色谱条件中的流动相，那么可以按下述方法优化现有方法。在进样前保证20倍流动相平衡色谱柱，且流动相比例与初始流动相比例保持一致，这部分平衡色谱柱的习惯需要养成，可以省去很多不必要的麻烦。将流动相充分超声，保证无盐粒析出后再使用。如果还是出现色谱峰随着进样的延续，色谱峰后移，那么建议延长洗脱时间，观察是否上一针的残留影响了下一针出峰，可使用高有机相洗脱一段时间，再进下一针。

下面分享几位版主的优质回复：

Welewolf:“液质分析采用梯度洗脱的，在测样之前，需要使用初始流动相对色谱柱进行充分的平衡，一般需要大于等于20倍的柱体积对其进行平衡”；

sdlzkw007：“有2点需要注意：1）高比例的有机相可能出现缓冲盐析出，导致不能准确按照设置梯度洗脱。2）进样前仅有20分钟平衡肯定不够，可以粗略计算有多少流动相经过色谱柱。”

Hujiangtao：“目标物出完峰以后最好有高比例有机相冲柱子时间，把柱子上残留的物质尽量冲洗干净，不然有时候可能影响目标物保留时间，可以考虑后面加一个几分钟的100%乙腈冲洗程序，然后再恢复到初始流动相平衡几分钟再进下一针看看有无改善；还有就是缓冲体系pH值是否稳定，不稳定的话也可能影响保留时间。”

最后感谢仪器信息网给我们大家提供交流的平台！

分
该帖子已被版主-hujiangtao加10积分，加2经验;加分理由:鼓励原创

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dadgoh

第1楼2020/09/20

应助达人

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