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LC/MS，化和物的保留时间、梯度洗脱

Ins_b8fe1c28

2021/01/14

液质联用（LCMS）

化和物的母、子离子对，Frag和CE全部摸索出来。个人认为：接下来应该配制混标，通过设置梯度洗脱，将所有目标物质（20多种）进行分离。想请教大家，我是接上柱子，设置梯度，每个单标单独摸索保留时间，最后将所有单标的信息整合到一块转为dMRM。但感觉好麻烦。还是，使用混标，接上柱子、设置梯度，使用MRM进行扫描，验证能不能将各个化合物分开。但这样做的话，不知道化合物的保留时间，不知道怎么设置分段MRM，但如果不设置分段的话，这么多化合物，同时进行扫描，是不是这样做是错误的。我看别人这样做的，最后一个出峰的目标物，采集上面其他化和物的信息。不是MRM扫描的，就一个量和一个定性离子么，所以，这样到底行不行。自己是个新手，很多东西还不是太懂，想请教一下各位大佬，或者能不能在得到母、子离子对，CE和Frag以后，后续的因该怎么做的思路，

分
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hujiangtao

第1楼2021/01/14

应助达人

质谱条件优化好了，直接流动相设置大梯度，比如UPLC的话5min内有机相线性从5%升到100%，把所有离子对放在一个通道里面，MRM模式没完全分开也没关系只要离子对不同就基本不影响，然后再根据保留时间划分时间窗口

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sdlzkw007

第2楼2021/01/14

应助达人

有些仪器根本就不需要时间分段，因为扫描速度足够快，满足同时测试100对以上的离子对。至于梯度洗脱可以参考文献或者标准规范，简单摸索一下也可以，不用纠结分离度，大部分都是离子对不同的提取峰面积计算，分离度几乎没有影响。

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