CNS_19.008_甜菊糖苷

enhua

2021/08/08

私聊

食品添加剂

甜菊糖苷

鄢龙翔

二〇二一年七月 28 日

摘要

甜味是一种人们喜爱的味道, 甜味也是影响食品口感的一个非常重要的因素。甜味剂有很多种分类方法, 按其来源可分为两类。一类是天然甜味剂如甘草甜素、甜菊糖苷等, 另一类是合成甜味剂如糖精、帕拉金糖等。如今, 由于低热量、口感好的食品越来越受到人们的青睐, 使得各种各样的高强度甜味剂在食物、饮料、糕点和制药工业等领域中的应用也越来越普遍。这些新型甜味剂大多是非糖类物质, 具有甜度高、热量低、不易发生龋齿、安全性高等优点。此外, 在代谢过程中它们不受胰岛素的控制, 不会引起肥胖症和血压升高, 适合糖尿病、肥胖症患者作为甜味的替代品。[1] 甜菊糖苷是从天然甜料植物甜叶菊

(steviosideRebaudinahBertoni) 的甜叶中提取的一类高甜度、低热量、对人体无副作用的天然产物, 对肥胖病、糖尿病、高血压病、心脏病、龋齿等也有一定的辅助治疗作用[2]。甜菊糖苷的甜度是蔗糖的200～300倍, 而其热值却为蔗糖的1/300, 所以目前不少厂家把甜菊糖苷作为一种甜味剂替代蔗糖。甜菊糖苷是经我国卫生部、轻工业部批准使用的最接近蔗糖口味的天然低热值甜味剂[3]。它是继甘蔗甜菜糖之外第3种有开发价值和健康推崇的天然蔗糖替代品, 被国际上誉为“世界第三蔗糖”。随着人们对健康的关注程度越来越重, 甜菊糖作为一种功能性糖类必将具有良好的市场前景。在1988年第33次FAO/WHO食品添加剂和污染物联合专家委员会 (JECFA) 会议上, 所有以甜叶菊为主要成分的混合物都被统称为“steviol glycosides”。按照我国相关的行业标准GB 8270-1999规定中文商品名应为:甜菊糖苷。该决议改变了市场上甜叶菊生产厂家给自己产品随意命名的混乱现象, 将

stevioside, stevia extract, purified stevia extract, 甜叶菊糖苷, 甜叶菊提取物, 甜叶菊糖等名字统一起来, 统一名称定为:甜菊糖苷[4]。[5]本文收集甜菊糖苷相关资料。

1．理化性质[6]

甜菊糖苷纯品为白色结晶粉末, 熔点198 ℃左右, 易溶于水、甲醇、乙醇, 可溶于四氢呋喃, 不溶于苯、醚、氯仿等有机溶剂, 有较好的耐热性和稳定性, 在95 ℃下加热处理2 h 甜度不变, 即使加热9 h甜度降低也很少;pH在3～9内稳定, 100 ℃下热处理1 h也无变化。耐盐性好, 无美拉德褐变, 不被微生物同化和发酵, 因此可延长甜菊糖苷制品的保质期。[23]

1.1 主要糖苷的分子式

甜菊苷：C38H60O18 瑞鲍迪苷A：C44H70O23

1.2 9 种糖苷的结构式

9种糖苷的化合物名称、R1位取代基和R2位取代基见表1

表 1

化合物名称
中文名称	英文名称	R1 位取代基	R2 位取代基
甜菊苷	stevioside	β-Glc	β-Glc-β-Glc(2→1)
瑞鲍迪苷 A	rebaudiosideA	β-Glc	β-Glc-β-Glc(2→1) \| β-Glc(3→1)
瑞鲍迪苷 B	rebaudiosideB	H	β-Glc-β-Glc(2→1) \| β-Glc(3→1)
瑞鲍迪苷 C	rebaudiosideC	β-Glc	β-Glc-α-Rha(2→1) \| β-Glc(3→1)
瑞鲍迪苷 D	rebaudiosideD	β-Glc-β-Glc(2→1)	β-Glc-β-Glc(2→1) \| β-Glc(3→1)
瑞鲍迪苷 F	rebaudiosideF	β-Glc	β-Glc-β-Xyl(2→1) \| β-Glc(3→1)
杜克苷 A	dulcosideA	β-Glc	β-Glc-α-Rha(2→1)
甜茶苷	rubusoside	β-Glc	β-Glc
甜菊双糖苷	steviolbioside	H	β-Glc-β-Glc(2→1)

主要糖苷的相对分子质量

甜菊苷:804.88（按2007年国际相对原子质量）

瑞鲍迪苷A：967.03（按2007年国际相对原子质量）

1.3 技术要求

感官要求应符合表2的规定。

表2感官要求

项目	要求	检验方法
色泽	白色至浅黄色	取适量试样置于清洁、干燥的白瓷盘中,在自然光线下观察其色泽和状态
状态	粉末或晶体	取适量试样置于清洁、干燥的白瓷盘中,在自然光线下观察其色泽和状态

理化指标应符合表3的规定。

表3 理化指标

项目		指标	检验方法
甜菊糖苷含量(以干基计,w)/%	≥	85	附录A中A.3
灼烧残渣(w)/%	≤	1	GB5009.4
干燥减量(w)/%	≤	6	GB5009.3直接干燥法a
铅(Pb)/(mg/kg)	≤	1	GB5009.12
总砷(以As计)/(mg/kg)	≤	1	GB5009.11
甲醇/(mg/kg)	≤	200	附录A中A.4
乙醇/(mg/kg)	≤	5000	附录A中A.4
注:商品化的甜菊糖苷产品应以符合本标准的甜菊糖苷为原料,可添加用于标准化目的的淀粉等食品原料。
a 干燥温度和时间分别为105°C±2°C和2h。

2.甜菊糖苷的功能

2.1 降血糖

人体摄入甜菊糖苷后,其在人体不能被消化道的酶分解消化。正因为如此人体摄入甜菊糖苷后血糖浓度不会发生升高的变化,其中主要成分甜菊苷通过促进胰岛素的释放以达到降血糖的效果[7] ,可用于Ⅱ型糖尿病的辅助治疗。对四氧嘧啶引起的血糖升高有良好的效果[8] 。曹芳等[9] 人通过注射四氧嘧啶造成糖尿病小鼠模型做材料,用甜菊糖苷给糖尿病模型小鼠灌胃一周,研究表明中、高浓度的甜菊糖苷具有明显的降低血糖的效果,随着浓度的升高降血糖的效果不断增强,其降血糖的效果达到消渴丸水平。

2.2 降血压甜菊糖苷具有一定的降压作用,静脉注射甜菊糖苷时,产生明显的血管舒张效应,从而达到一个有效而迅速降压的效果[10] 。有实验证明甜菊糖苷的降压机制还可能是对钙离子内流的抑制作用有关[11] ,Melis等给大鼠进行静脉注射甜菊糖苷,研究发现能够剂量依赖性的对血压产生降低作用[12,13] 。甜菊糖苷的酸性条件下的水解产物异甜菊醇也具有一定的降血压的作用[14] 。

2.3 抑菌抗炎

有研究发现甜菊苷及甜菊醇这两种成分,对结肠癌细胞 Caco-2 以及乳腺炎细胞具有抗炎和免疫调节活性。甜菊糖苷的抗炎机制可能是通过抑制NF-k B通路和丝裂原活化蛋白激酶通路进而抑制促炎性细胞因子的释放从而达到良好的抗炎效果[9] 。甜菊糖苷中含有一种名为的甜菊醇的成分,是甜菊苷的组成苷元,分子为贝壳杉烯型四环二萜骨架结构,其具有一定的抑菌消炎作用[15] 。

2.4 抗肿瘤

经一些研究发现,甜菊糖苷还具有抗肿瘤的作用,它是通过一系列的机制使得肿瘤细胞发生凋亡从而达到抗肿瘤的作用。经一些研究发现,甜菊苷的苷元甜菊醇因其特殊的贝壳杉烯型四环二萜骨架结构使其具有一定的抗肿瘤作用。[16]

3 甜菊糖苷前景分析

甜菊糖苷作为食品添加剂其安全性曾一度受到国际上很多学者的怀疑, 主要是对甜菊糖苷中含有的甜菊醇 (steviol) 的安全性有争议, 甜菊醇在沙门氏菌TM677诱变实验, CHL染色体畸变试验, 以及 CHL 基因突变试验中均表现出具有剂量依赖性作用[17]。而 R.E.Wingard等[18]认为甜菊糖苷 (stevioside) 和莱鲍迪苷A (Rebaudioside A) 可以被小鼠的肠道细菌分解为steviol, 但是他们在以公鸡为试验材料研究认为:甜菊糖苷通过公鸡的肠道没有任何的变化, 可能甜菊糖苷的分解与盲肠有关。然而大量的动物试验并没有发现甜菊糖苷的急性、短期、及遗传毒性, 无致癌、促癌作用, 对生长繁殖、胎鼠发育也无明显的副作用, 对人体代谢功能无任何的不良影响。在经过几次的食品添加剂申请以后, 终于在2004年8月FAO/WHO食品添加剂和污染物联合专家委员会 (JECFA) 的第63次日内瓦会议上认可了甜菊糖苷使用的施行案[19], 另外, 我国在2007年8月23日颁布2008年6 月1日起实施的食品添加剂使用卫生标准中允许在蜜饯凉果、烘焙/炒制果与籽类、糖果、糕点、调味品、饮料类 (除外包装饮用水类) 、油炸小食品中可以添加适量的甜菊糖苷作为甜味剂[20]。这就为甜菊糖苷的广泛应用打开了一扇大门, 甜菊糖苷必将有更广阔的发展。

尽管甜菊糖苷在人体中有不少的药理保健作用, 但是有些作用机理还不是非常清楚, 还需要有更深入的研究, 而且对于不同的人群其代谢的途径也许不同。在安全性方面的研究也应该更深, 应该有更多的医学证据证明甜菊糖苷对人体的健康状况的影响。已有人[21]从分子结构阐述了甜菊糖苷的苦涩后味成因机理, 而且也有人根据这个机理而解决了苦涩后味问题, 并申请了专利[22]。虽然甜菊糖苷不是一种新产品, 它也曾经引起了人们的关注, 但是最近FAO/WHO食品添加剂和污染物联合专家委员会 (JECFA) 和我国食品添加剂使用卫生标准才认可甜菊糖苷, 所以对于一种新的添加剂的认识是一个漫长的过程, 都需要进行长期的研究。相信随着甜菊糖苷应用的不断扩大, 随着研究的不断深入, 甜菊糖苷必将成为一种被广泛接受的添加剂。[23]

参考文献

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[5]王飞生,叶荣飞,闵建.甜菊糖苷的特性及应用[J].中国调味品,2009,34(10):91-95+117.

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[9]曹芳，冯文静，陈明，等．甜菊糖苷降血糖作用研究[J]．中国药物与临床，2009，

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[10]王飞生，叶荣风，闵建．甜菊糖苷的特性及应用[J]．中国调味品，2009，34(10):91 －117．

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[14]余双双，张大永．甜菊苷及其衍生物的生物活性研究进展[J]．药学进展，2014，

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[15]胡林，寇彦杰，翁永京，等．高效液相色谱法测定甜菊糖苷中甜菊醇的含量[J]．天然产物研究与开发，2014(10):1644－1646．

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[22] 王德骥.一种直接制出没有苦涩味的甜菊糖苷的技术方法[P].中国专利号:2006100360642,2008-01-02.

[23]王飞生,叶荣飞,闵建.甜菊糖苷的特性及应用[J].中国调味品,2009,34(10):91-95+117.

附录 A 检验方法[6]

1.%2 一般规定

本标准所用试剂和水,在没有注明其他要求时,均指分析纯试剂和GB/T6682中规定的三级水。试验中所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品,在没有注明其他要求时,均按 GB/T601、GB/T602、GB/T603的规定制备。试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时,均指水溶液。

2.%2 鉴别试验

1.%2.%3 甜菊苷和瑞鲍迪苷A试验

在甜菊糖苷含量试验中,试样溶液的液相色谱图中甜菊苷和瑞鲍迪苷A两个主峰应与混合标准溶液的色谱图相对应。

2.%2.%3 试样溶液的pH

称取1g试样,溶于100mL水中,用酸度计测定试样溶液的pH在4.5~7.0。

A.3 甜菊糖苷含量的测定

A.3.1 方法一

A.3.1.1 试剂和材料

1.%2.%3.%4.%5 乙腈:色谱纯。

2.%2.%3.%4.%5 磷酸二氢钠:色谱纯。

3.%2.%3.%4.%5 磷酸:色谱纯。

4.%2.%3.%4.%5 水:GB/T6682—2008中规定的一级水。

5.%2.%3.%4.%5 乙腈水溶液:乙腈和水的体积比为30∶70。

6.%2.%3.%4.%5 磷酸钠缓冲液(pH2.6):称取1.20g磷酸二氢钠(NaH2PO4),溶于800mL水中,用磷酸调节pH至2.6。

7.%2.%3.%4.%5 甜菊苷标准品:甜菊苷含量(质量分数,以干基计)≥99.0%。

8.%2.%3.%4.%5 瑞鲍迪苷A标准品:瑞鲍迪苷A含量(质量分数,以干基计)≥99.0%。

9.%2.%3.%4.%5 其他7种糖苷标准品:瑞鲍迪苷B、瑞鲍迪苷C、瑞鲍迪苷D、瑞鲍迪苷F、杜克苷A、甜茶苷和甜菊双糖苷。

2.%2.%3.%4 仪器和设备

高效液相色谱仪:配备紫外检测器,或其他等效的检测器。

3.%2.%3.%4 参考色谱条件

A.3.1.3.1 色谱柱:C18反相色谱柱,250mm×4.6mm,粒径5μm;或其他等效的色谱柱。

A.3.1.3.2 流动相:乙腈∶磷酸钠缓冲液=32∶68。

A.3.1.3.3 流动相流速:1.0mL/min。

A.3.1.3.4 检测波长:210nm。

A.3.1.3.5 进样量:2μL~10μL。

A.3.1.3.6 柱温:40℃。

A.3.1.4 分析步骤

1.%2.%3.%4.%5 混合标准品溶液的制备

分别称取适量甜菊苷、瑞鲍迪苷A、瑞鲍迪苷B、瑞鲍迪苷C、瑞鲍迪苷D、瑞鲍迪苷F、杜克苷A、甜茶苷、甜菊双糖苷标准品,置于同一个容量瓶中,用乙腈水溶液完全溶解后定容,得到混合标准品溶液。

混合标准品溶液用于确定9种糖苷的相对保留时间。

2.%2.%3.%4.%5 标准溶液的制备

分别称取0.05g甜菊苷标准品和瑞鲍迪苷A标准品,精确至0.001g,分别置于50mL的容量瓶中,用乙腈水溶液溶解后稀释至刻度,得到甜菊苷标准溶液和瑞鲍迪苷A标准溶液。

3.%2.%3.%4.%5 试样溶液的制备

g试样,精确至0.001g,置于50mL的容量瓶中,用乙腈水溶液溶解后稀释至刻度,

5.%2.%3.%4 测定

在A.3.1.3参考色谱条件下,分别对混合标准品溶液、标准溶液和试样溶液进行色谱分析。将试样溶液的色谱图与混合标准品溶液的色谱图相比较,以确定试样溶液色谱图中各组分对应的峰。记录试样溶液色谱图中甜菊苷、瑞鲍迪苷A、瑞鲍迪苷B、瑞鲍迪苷C、瑞鲍迪苷D、瑞鲍迪苷F、杜克苷A、甜茶苷、甜菊双糖苷的峰面积及标准溶液色谱图中甜菊苷和瑞鲍迪苷A的峰面积。

6.%2.%3.%4 结果计算

瑞鲍迪苷A含量(以干基计)的质量分数wa按式(A.1)计算:

……………………(A.1)

式中:

mR———瑞鲍迪苷A标准溶液中瑞鲍迪苷A的质量(以干基计),单位为毫克(mg);

m ———试样溶液中试样的质量(以干基计),单位为毫克(mg);

Aa ———试样溶液色谱图中瑞鲍迪苷A的峰面积值;

AR———瑞鲍迪苷A标准溶液色谱图中瑞鲍迪苷A的峰面积值。

其他8种糖苷含量(以干基计)的质量分数wi按式(A.2)计算:

……………………(A.2)

式中:

i ———s、b、c、d、f、da、ru、sb,分别对应甜菊苷、瑞鲍迪苷B、瑞鲍迪苷C、瑞鲍迪苷D、瑞鲍迪苷F、杜克苷A、甜茶苷、甜菊双糖苷;

mS———甜菊苷标准溶液中甜菊苷的质量(以干基计),单位为毫克(mg);

m———试样溶液中试样的质量(以干基计),单位为毫克(mg);

fi———i组分与甜菊苷的式量比值:1.00(甜菊苷)、1.00(瑞鲍迪苷B)、1.18(瑞鲍迪苷C)、1.40(瑞鲍迪苷D)、1.16(瑞鲍迪苷F)、0.98(杜克苷A)、0.80(甜茶苷)、0.80(甜菊双糖苷);

Ai———试样溶液色谱图中i组分的峰面积值;

AS———甜菊苷标准溶液色谱图中甜菊苷的峰面积值。

由式(A.1)和式(A.2)计算得到9种组分的含量wa、ws、wb、wc、wd、wf、wda、wru和wsb,取各组分含量之和即为试样中甜菊糖苷含量。

A.3.2 方法二

A.3.2.1 试剂和材料

1.%2.%3.%4.%5 乙腈:色谱纯。

2.%2.%3.%4.%5 磷酸二氢钠:色谱纯。

3.%2.%3.%4.%5 磷酸:色谱纯。

4.%2.%3.%4.%5 水:GB/T6682—2008中规定的一级水。

5.%2.%3.%4.%5 乙腈水溶液:乙腈和水的体积比为30∶70。

6.%2.%3.%4.%5 磷酸钠缓冲液(pH2.6):称取1.20g磷酸二氢钠(NaH2PO4),溶于800mL水中,用磷酸调节pH至2.6,用水稀释至1000mL。

7.%2.%3.%4.%5 甜菊苷标准品:甜菊苷含量(质量分数,以干基计)≥99.0%。

8.%2.%3.%4.%5 其他8种糖苷标准品:瑞鲍迪苷A、瑞鲍迪苷B、瑞鲍迪苷C、瑞鲍迪苷D、瑞鲍迪苷F、杜克苷A、甜茶苷和甜菊双糖苷。

2.%2.%3.%4 仪器和设备同A.3.1.2。

3.%2.%3.%4 参考色谱条件同A.3.1.3。

4.%2.%3.%4 分析步骤

1.%2.%3.%4.%5 混合标准品溶液的制备

分别称取适量甜菊苷、瑞鲍迪苷A、瑞鲍迪苷B、瑞鲍迪苷C、瑞鲍迪苷D、瑞鲍迪苷F、杜克苷A、甜茶苷、甜菊双糖苷标准品,置于同一个容量瓶中,用乙腈水溶液完全溶解后定容,得到混合标准品溶液。

混合标准品溶液用于确定9种糖苷的相对保留时间。

2.%2.%3.%4.%5 标准溶液的制备

称取0.05g甜菊苷标准品,精确至0.001g,置于50mL的容量瓶中,用乙腈水溶液溶解后稀释至刻度,得到甜菊苷标准溶液。

3.%2.%3.%4.%5 试样溶液的制备

称取0.05g~0.1g试样,精确至0.001g,置于50mL的容量瓶中,用乙腈水溶液溶解后稀释至刻度,得到试样溶液。

5.%2.%3.%4 测定

在A.3.2.3参考色谱条件下,分别对混合标准品溶液、标准溶液和试样溶液进行色谱分析。将试样溶液的色谱图与混合标准品溶液的色谱图相比较,以确定试样溶液色谱图中各组分对应的峰。记录试样溶液色谱图中甜菊苷、瑞鲍迪苷A、瑞鲍迪苷B、瑞鲍迪苷C、瑞鲍迪苷D、瑞鲍迪苷F、杜克苷A、甜茶苷、甜菊双糖苷的峰面积及标准溶液色谱图中甜菊苷的峰面积。

6.%2.%3.%4 结果计算

9种糖苷含量(以干基计)的质量分数wi按式(A.3)计算:

……………………(A.3)

式中:

i ———s、a、b、c、d、f、da、ru、sb,分别对应甜菊苷、瑞鲍迪苷A、瑞鲍迪苷B、瑞鲍迪苷C、瑞鲍迪苷D、瑞鲍迪苷F、杜克苷A、甜茶苷、甜菊双糖苷;

mS———甜菊苷标准溶液中甜菊苷的质量(以干基计),单位为毫克(mg);

m———试样溶液中试样的质量(以干基计),单位为毫克(mg);

fi———i组分与甜菊苷的式量比值:1.00(甜菊苷)、1.20(瑞鲍迪苷A)、1.00(瑞鲍迪苷B)、1.18(瑞鲍迪苷C)、1.40(瑞鲍迪苷D)、1.16(瑞鲍迪苷F)、0.98(杜克苷A)、0.80(甜茶苷)、0.80(甜菊双糖苷);

Ai———试样溶液色谱图中i组分的峰面积值;

AS———甜菊苷标准溶液色谱图中甜菊苷的峰面积值。

由式(A.3)计算得到9种组分的含量ws、wa、wb、wc、wd、wf、wda、wru和wsb,取各组分含量之和即为试样中甜菊糖苷含量。

A.4 甲醇和乙醇的测定

A.4.1 试剂和材料

1.%2.%3.%4 甲醇:色谱纯。

2.%2.%3.%4 乙醇:色谱纯。

3.%2.%3.%4 水:一级水。

A.4.2 仪器和设备

气相色谱仪:配有氢火焰离子化检测器(FID)和顶空进样器。

A.4.3 参考色谱条件

A.4.3.1 色谱柱:键合聚乙二醇熔融石英毛细管柱(柱长为30m,柱内径为0.25mm,膜厚度为 0.25μm),或其他等效的色谱柱。

A.4.3.2 载气:氮气(纯度≥99.99%)。

A.4.3.3 载气流量:5.0mL/min。

A.4.3.4 柱温:40℃保持5min,以10℃/min升温至120℃,保持2min,最后以16℃/min升温至 200℃,保持5min。

A.4.3.5 进样口温度:200℃。

A.4.3.6 检测器温度:250℃。

A.4.3.7 进样体积:1mL。 A.4.3.8 分流比:1∶50。

A.4.4 参考顶空条件

A.4.4.1 顶空瓶温度:80℃。 A.4.4.2 顶空瓶平衡时间:30min。

A.4.4 参考顶空条件

1.%2.%3.%4 顶空瓶温度:80℃。

2.%2.%3.%4 顶空瓶平衡时间:30min。

A.4.5 分析步骤

1.%2.%3.%4 空白溶液的制备

移取2mL水,置于顶空瓶中,迅速压紧瓶盖,备用。

2.%2.%3.%4 标准溶液的制备

1.%2.%3.%4.%5 甲醇标准溶液的制备

称取0.1g甲醇,精确至0.001g,用水稀释后转移至一个1000mL的容量瓶中,加水至刻度,摇匀,即得100mg/L的甲醇标准储备溶液。将该溶液配制成一系列浓度为50mg/L、20mg/L、10mg/L、5mg/L 和2.5mg/L的甲醇标准溶液。移取上述系列浓度溶液各2mL,分别置于顶空瓶中,迅速压紧瓶盖,备用。

2.%2.%3.%4.%5 乙醇标准溶液的制备

称取0.1g乙醇,精确至0.001g,用水稀释后转移至一个100mL的容量瓶中,加水至刻度,摇匀, 即得1000mg/L的乙醇标准储备溶液。将该溶液配制成一系列浓度为750mg/L、500mg/L、

200mg/L、100mg/L和50mg/L的乙醇标准溶液。移取上述系列浓度溶液各2mL,分别置于顶空瓶中,迅速压紧瓶盖,备用。

A.4.5.3 试样溶液的制备

称取1.0g试样,精确至0.001g,用水溶解后转移至一个10mL的容量瓶中,在室温下超声处理约

3min,加水稀释至刻度,摇匀。移取该溶液2mL置于顶空瓶中,迅速压紧瓶盖,备用。

6.%2.%3 测定

在参考操作条件(A.4.3和A.4.4)下,分别对空白溶液、标准系列溶液和试样溶液进行测定,记录甲醇或乙醇的峰面积值。以标准系列溶液色谱图中甲醇或乙醇的峰面积值为Y轴,以对应溶剂浓度 (mg/L)为X轴,绘制标准曲线,得到甲醇标准曲线或乙醇标准曲线。根据试样溶液色谱图中甲醇或乙醇的峰面积值,从标准曲线求得试样溶液中甲醇或乙醇的浓度(mg/L)。

7.%2.%3 结果计算

甲醇或乙醇含量w以毫克每千克(mg/kg)计,按式(A.4)计算:

w=cm×V……………………(A.4)

式中:

c———从标准曲线求得的试样溶液中甲醇或乙醇的浓度,单位为毫克每升(mg/L);

V———试样溶液的体积,单位为毫升(mL);

m———试样的质量,单位为克(g)。

附录 B [6]

混合标准品溶液的参考色谱图

混合标准品溶液的参考色谱图见图B.1。