委托检测实例：异烟碱衍生物液质方法

叮叮当当

2021/08/21
冲锋队

私聊

液质联用（LCMS）

找的检测公司给摸得液质方法，样品自己处理好送过去测，没做方法学，有需要拿走不谢。

1 实验材料

待测物：大鼠血浆。

对照品及内标：异烟碱衍生物。

主要仪器：液相质谱联用仪：Angilent 1260 HPLC；AB Triple Quad 4000 三重四级杆串联质谱仪。

2 分析条件

2.1 液相条件：

Thermo色谱柱：C18 (2.1 mm×100 mm，3 μm)。

流动相：A 相：水（含0.1 %甲酸），B相： MeOH（0.1%甲酸）；等度洗脱条件：

Time
(min)
Flow Rate
(mL/min)
A %
B %
Initial
0.25
30
70
6
0.25
30
70

洗针程序：5s 有机溶液（甲醇：水=1:1）清洗，5s纯水超声清洗，后用5s有机溶液（甲醇：水=1:1）清洗。

自动进样器温度：4.0 ℃；进样量：5.0 μL，柱温：20.0 ℃。

2.2 质谱条件

AB Triple Quad 4000 三重串联四级杆质谱分析系统： ESI 离子源，正离子分析模式，MRM 扫描方式，参数设置：

CAD：8 psi；CUR：20；GS1：40V；GS2: 60V ; TEM：550.0 °C；IS：-4300;

MRM 方法参数：

Compound
定量离子对
定性离子对
Dwell Time (ms)
DP
(V)
EP
(V)
CE
(V)
CXP
(V)
对照品
337.2/229.1
337.2/157.1
100.00
74
10
34
18
内标
351.2/229.1
351.2/157.1
100.00
74
10
34
18

备注：CE参数为定量离子对所对应的参数。

3 标准曲线、质控样品、内标储备液及工作液的配制

3.1标曲工作液，质控工作液，含内标的沉淀蛋白溶剂均有甲方配制提供。

4.生物样本处理方法

血浆标准品、质控样品及血浆样品均有甲方处理送样。

5.测试结果

线性：(y=0.014x+0.00361; r=0.9983;1-1000 ng/mL)。色谱质谱图如下，标曲及样品数据见附图Excel。

Fig 1. 异烟碱衍生物及内标的典型质量色谱图