液相色谱保留时间波动问题

应助达人

使用什么色谱柱？等度洗脱还是梯度洗脱？流动相pH这么低！，平衡主子的时候压力稳定吗？可以尝试把柱平很时间延长一点。最好不要引入三氟乙酸，这个东西残留会比较严重（这点是我老大某次跟我说，具体没试过）

色谱柱用过ODS-A、triart-C18、LP-C18，梯度等度也都试过。我们现在一台仪器上摸索方法，将各峰分离，但是更换至另外的仪器，或者更换流动相，相对保留时间就波动很大，而且还会发生杂质出峰位置颠倒交换的情况。主成分一个含有氨基和羧基，另一个含有肼基和羧基，基本上属于两性化合物，它们的杂质从结构上来看也同样是两性化合物。目前就是方法的重现性很差，不知道从何下手来优化。

如果你知道几个主要成分是什么物质，建议你先查一下它们的药典文献，参考药典的色谱条件。查询药典的网站https://www.drugfuture.com/standard/

谢谢你！我们就是先从药典方法着手优化的，今天发现提高柱温至40℃相对保留时间比较稳定，感觉这可能是一个可行的方向。