首先考虑是否为色谱条件不够好,导致两种物质没有分离,形成两个峰交叉的M峰。
如果确定该峰为单一物质,若该物质已知,且曾经做过该浓度峰型良好,考虑色谱柱故障,故障可能存在于筛板或填料塌陷。若该物质未知,且该浓度为经过确认,考虑是否为色谱条件(主要是pH值)不够好或者浓度过高超过色谱柱保留能力。
如果该峰无法确定是否为单一物质,应先在二极管阵列检测器上测定一次,确认M峰的两个峰尖处紫外吸收是否相似,用以确认两者是否为同一物质。不过有时即使紫外吸收一致,也应考虑该物质是否具有异构体,手性异构有时会影响物质极性导致峰分叉。