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液相色谱常见问题Q&A之基线异常

大耳朵兔兔

2022/03/25

液相色谱（LC）

基线问题是色谱中通常碰到比较多的问题，处理起来相对简单。基线不正常，对实验的结果影响很大，甚至可能导致实验没办法进行下去。一般基线问题主要分为基线漂移和基线噪音两方面。
基线漂移：
问：造成基线漂移的主要原因有哪些？
答：（1）环境温度波动，尤其是对于一些灵敏度很高的检测器，如示差检测器，电导检测器影响更大；（2）色谱柱或检测器未平衡好，通常碰的比较多的是氨基柱，氨基柱的平衡需要的时间比一般色谱柱都要长一些；（3）流动相不均一，互溶性不太好；（4）流动相，色谱柱，流通池污染；

Tips:

如果是检测器污染，可以选择强溶剂，如甲醇乙腈冲洗，必要时可选择1N硝酸溶液冲洗；

（1）样品中有强保留物质，洗脱慢，类似基线漂移；

（2）流动相比例或流速发生变化；

基线噪音：
问：基线噪音产生的主要原因有哪些？
答：（1）流动相脱气不完全，泵，管路，色谱柱或检测器中有空气；（2）流动相互溶性不好，混合不完全；（3）流动相，色谱柱或检测器污染；（4）系统有漏液；（5）紫外检测器氘灯能量不够；（6）使用紫外检测器时，选择的检测波长在溶剂紫外吸收截止波长附近；（7）数据采集频率过高（这个比较容易被忽视）；
TIPs:
在日常实验中，造成基线问题最大的原因就是污染，包括色谱柱，流动相，系统管路和检测器。因此养成良好的实验习惯，如每天实验完之后及时冲洗干净色谱柱，定期对仪器系统进行清洗或者更换部件等，尽可能避免基线问题的出现。

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