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山梨酸回收率低

  • 初雪共白头
    2022/04/23
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 乳制品,2g样品,25ml水,超声提取,加亚铁氰化钾溶液(92g/L)2ml,乙酸锌(183g/L)溶液2ml,混匀,8000r/min 5分钟,上清液收集,继续加15ml水,混匀超声提取,8000r/min 5分钟,上清液合并收集,定容50ml。
    检测器:紫外 检测器波长:230nm 流速:1.0ml/min 进样体积:20μL 色谱柱:C18 4.6×250mm 5μm 柱温:30℃ 流动相:甲醇:乙酸铵溶液(20mmol/l,PH调制4.9左右)=14:86

    山梨酸回收率偏低,每次回收率都是85-90之间,大家帮忙分析下啥原因,怎么解决呢?

    我这几天做的试验回复在8楼了,大家可以看看,帮我解决下疑惑
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  • mingxiaoyan

    第1楼2022/04/24

    上机前过滤了吗

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  • 初雪共白头

    第2楼2022/04/26

    针孔过滤器过滤了

    mingxiaoyan(mingxiaoyan) 发表:上机前过滤了吗

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  • mingxiaoyan

    第3楼2022/04/26

    可以对比一下不过滤,有可能过滤器吸附影响

    初雪共白头(Ins_d748e5e1)发表: 针孔过滤器过滤了

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  • 初雪共白头

    第4楼2022/04/28

    对比了过滤和不过滤的,没影响

    mingxiaoyan(mingxiaoyan) 发表:可以对比一下不过滤,有可能过滤器吸附影响

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  • 有水有渝

    第5楼2022/04/28

    应助达人

    这个离心后的上清液怎么能保证收集完全?

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  • 安平

    第6楼2022/04/29

    应助达人

    回收率看上去也没有什么问题。

    楼主详细描述一下具体的前处理步骤为好。

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  • 初雪共白头

    第7楼2022/04/30

    目前是收集两次 试验过收集三次的 没差别 两次还是能够收集完全的

    有水有渝(xky0230699) 发表:这个离心后的上清液怎么能保证收集完全?

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  • 初雪共白头

    第8楼2022/04/30

    说下我现在的情况
    实验过两种沉淀剂:乙酸铅、草酸钾磷酸氢二钠和乙酸锌、亚铁氰化钾,乙酸铅那组沉淀剂回收率明显比乙酸锌这组的回收率高,但奈何国标上要求用乙酸锌。可以看出沉淀剂对回收率有影响的
    乙酸锌这组沉淀剂,试验过加不同体积的沉淀剂,1ml、2ml、3ml,加1ml的沉淀剂回收率明显比加2ml、3ml要好,回收率在90-92之间,2ml和3ml的在85左右。可以看出沉淀剂的量对回收率也有影响。
    虽然回收率合格了,但也是在90附近,想提高到95以上,不知道通过什么可以提高?还有就是我虽然做了实验,也得出了初步的结论,但不清楚这之间的原理是什么?
    望大家可以帮忙解决下我的困惑

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  • Ins_8c44e46e

    第9楼2022/05/01

    猜测可能是由于三倍体积的沉淀剂对原样品的稀释倍数过大,如果样品浓度很低,这种稀释之后测定再计算产生的误差越大(理论上不会出现,实际测定中会出现这样的情况,根据我做其他生化实验的结果推测)。

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  • 有水有渝

    第10楼2022/05/03

    应助达人

    从你的实验验证来看,怎么觉得不加沉淀剂可能是最好的,这个沉淀剂会把待测成分破坏了还是也沉淀了?

    初雪共白头(Ins_d748e5e1) 发表:说下我现在的情况
    实验过两种沉淀剂:乙酸铅、草酸钾磷酸氢二钠和乙酸锌、亚铁氰化钾,乙酸铅那组沉淀剂回收率明显比乙酸锌这组的回收率高,但奈何国标上要求用乙酸锌。可以看出沉淀剂对回收率有影响的
    乙酸锌这组沉淀剂,试验过加不同体积的沉淀剂,1ml、2ml、3ml,加1ml的沉淀剂回收率明显比加2ml、3ml要好,回收率在90-92之间,2ml和3ml的在85左右。可以看出沉淀剂的量对回收率也有影响。
    虽然回收率合格了,但也是在90附近,想提高到95以上,不知道通过什么可以提高?还有就是我虽然做了实验,也得出了初步的结论,但不清楚这之间的原理是什么?
    望大家可以帮忙解决下我的困惑

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