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岛津LC16液相色谱测呕吐毒素不出峰

贪吃会长肉

2022/05/20

液相色谱（LC）

按照GB 5009.111-2016第二法测呕吐毒素，C18柱子，流动相：甲醇+水=20+80，流速0.8，柱温35，进样量20微升，检测波长218/220（两个全试过），标准品用甲醇稀释的（标品新买的），现在所有梯度的标准品只有溶剂峰，呕吐毒素不出峰，请教下各位大神，我应该从那几个方面调整测试？我想着流动相的比例应该是只影响保留时间，按理说不影响出峰效果，所以流动相没换比例，紫外检测器也是新买的。

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第1楼2022/05/22

应助达人

参考一下这个帖子https://m.instrument.com.cn/bbs/d-6281860-1.html

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dadgoh

第2楼2022/05/22

应助达人

先做一下样品的紫外全扫码，看一下样品的吸收强度，并确认具体最大吸收波长。以利于建立色谱条件。

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贪吃会长肉

第3楼2022/05/22

怎么做全扫码呢？
dadgoh(dadgoh) 发表:先做一下样品的紫外全扫码，看一下样品的吸收强度，并确认具体最大吸收波长。以利于建立色谱条件。

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安平

第4楼2022/05/22

应助达人

首先确定样品确实已经进样成功。

然后考虑是否灵敏度不足，或者保留时间不足。

不同色谱柱，保留性能不同，可以考虑使用梯度，或者提高流动相中的有机相比例，使用高浓度标准品进样实验。

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贪吃会长肉

第5楼2022/05/22

进样应该进去了，因为有个明显的峰，我用不同梯度试了，峰高峰面积都没变化，我猜测出的应该是溶剂甲醇的峰，我的标品用甲醇稀释的，甲醇出峰了，呕吐毒素峰不见
安平(byron1111) 发表:首先确定样品确实已经进样成功。然后考虑是否灵敏度不足，或者保留时间不足。不同色谱柱，保留性能不同，可以考虑使用梯度，或者提高流动相中的有机相比例，使用高浓度标准品进样实验。

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安平

第6楼2022/05/23

应助达人

有图么？

标样也确认一下。

修改一下流动相比例试试。

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robin_clhx

第7楼2022/05/23

用流动相配制工作溶液就能出峰了，只用甲醇作为工作溶液的溶剂存在溶剂效应！

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贪吃会长肉

第8楼2022/05/23

今天又测了大浓度的出峰了，这是浓度50和5的图，这个图峰面积也不行，而且5的图这个峰没有尖呢？峰型还都不好，这样我下一步改变什么呢？

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贪吃会长肉

第9楼2022/05/23

好的，谢谢！，我再试试
robin_clhx(robin_clhx) 发表:用流动相配制工作溶液就能出峰了，只用甲醇作为工作溶液的溶剂存在溶剂效应！

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贪吃会长肉

第10楼2022/05/23

出峰了，今天的图也不是多好，这是50和5的浓度的
安平(byron1111) 发表:有图么？标样也确认一下。修改一下流动相比例试试。

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