标准品液相色谱问题求助

应助达人

可能高浓度样品有残留导致的污染吧。

不同意楼主的进样顺序，最好是从低到高来检测，避免有残留对后续样品有影响。

应助达人

第一有没有稀释错？第二，稀释后不成线性，有没有其他物质带入或干扰?第三平头峰可能是熔剂峰？

应助达人

1.CK是啥？试剂空白还是系统空白？还是空白PB提取液？CK中13.7为什么峰型明显？
2.建议做一个试剂空白和系统空白，再用标液来定出峰时间，标液最好称量准确，浓度已知，否者没法定线性范围和估计检出限定量限。
3.RT一直在往前漂，坐下稳定性实验看看吧。
4.看了你的色谱图，从1000X到10000X就有问题，不成线性，峰面积降低的老厉害了，检查一下样品位置和序列编辑位置是否有误。
5.从1000X的峰高出现平头峰来看，这个化合物响应估计不会太好，峰高太低，CK中又有干扰，条件允许的话建议换一个检测方法。

应助达人

楼主用本台设备做其他指标结果如何？

应助达人

要判断目前您认为的目标物是不是真的叶酸峰。

之前实验室其他人做了其他物质标品的检测，是没有问题的，我明天准备换一个柱子看看是否真的是溶剂峰与物质峰重叠吧

ok，我明天试一试从低到高检测

稀释倍数是没有问题的，结果就是显示不成线性，做了两次都是这样，但稀释倍数增大后，平头峰的峰面积也会下降，我也不知道啥原因，现在考虑的是溶剂峰和物质峰是不是重叠在一起了，我把测的物质峰面积做了图，CK是用溶剂溶的，加了巯基乙醇和抗坏血酸钠。

CK是用的空白PB提取液，因为叶酸很容易氧化，所以得加抗坏血酸钠和巯基乙醇，CK的峰明显可能是溶剂峰。系统空白怎么做呢，流动相是乙腈-30mM磷酸盐缓冲液PH2.3。当然标准品肯定得重新称量好计算含量。保留时间我也发现在变化，怎么做稳定性实验呢，我也是新手来着。样品位置和序列编辑位置我下来查查怎么搞。谢谢解答