【求助】关于HPLC测定多糖分子量的问题

蒸发光散射检测器不能说明多糖分子量的均一问题吧？

是不是其他两成分还没有洗脱出来

不能说明么？？
我是这么理解的：首先，TSK G-4000PWxl是凝胶柱，是根据分子量来进行分离的，文献里对多糖分子量进行鉴定一般都是用的这个柱子（好像这根是专门的糖柱）..既然是根据分子量分离的，由于糖没有特征吸收峰，无法用PDA检测器检测，一般都是用示差检测器来检测的，我只不过是用ELSD检测器替代了示差检测器，应该能说明问题吧？？

应该出来了吧，因为我是连续使用机器的，也就是每个样走60min，然后冲洗10分钟后继续走下一个样....图形还是这样的....
存在的问题就是：之前我用Sephadex G-100对多糖进行过分离，显示是一个大峰，收集之后用DEAE-52洗脱，先用线性洗脱摸索最佳条件，然后确定采用梯度洗脱，洗脱出来的是三个峰...每个峰分别收集的话，透析冻干，然后再分别走Sepharose CL-6B层析柱，每个峰的出峰时间不一样，说明应该是三个不同分子量的组分....
也就是，直接进行分子渗透色谱分离的话就是一个峰，用离子交换能够给分离出三个不同的峰，而且每个峰的分子量还不同....

能告诉我你的色谱条件吗？是用酸性流动相的吗？流速0.3是不大的，那压力有多大？

流动相是用的超纯水，流速0.3ml/min，压力应该是在1.4MPa左右（这个记不清楚了）
蒸发光检测器温度是80℃，载气是用的氮气发生器自制的氮气.....

多糖成分只用纯水，用TSK G-4000PWxl柱子分离的话，就算是单组份应该也没有这样好才对啊，如果你用3个组分的标准品也不能分别在不同时间出峰的话，那么说明你的色谱条件有问题哦，个人以为做多糖用凝胶柱还是用酸性的缓冲液做流动相，调节PH到4.0左右，应该能提高分离的效率。

就算分子量不均一也可能得出这样的色谱峰，多糖凝胶渗透色谱的分离模式决定了它能分离高分子，具有相同化学性质的同系物。可能这3中物质性能比较接近。

如果用别的柱子确实分出3个组分，而TSK的柱子只有一个峰，那么你的分离条件就可能有问题：柱子没分开，原因有多种，比如流动相条件不对，柱子选的不对，柱子和样品有相互作用、吸附等。而且看你的峰，峰型明显不对，GPC的峰肯定不会象普通HPLC峰那么窄，那么尖，就算分散度为1的标样，也不应想你的样品峰这样，最起码分子量低的没分好。看你样品的出峰时间，在根据溶剂峰的出峰时间，按道理讲，柱子的分离效果不应该很差，但后面的峰出的如此之快就不对。
所以分离条件肯定有问题，在如此差的分离下，怎么判断分子量很均一？