氨的测定-靛酚蓝分光光度法的标准曲线显深黄色，无梯度

应助达人

今天做的靛酚蓝分光光度法的标准曲线的时候，标准曲线的颜色显色异常—深黄色，如图1，做了两组都是这样。
1.实验室用的试剂都是新购置的，水杨酸溶液（50g/L）、亚硝基铁氰化钠溶液（10g/L）、次氯酸钠溶液（0.05mol/L）、氨标准贮备溶液（1.00g/L）都是网上买已经配制好的。
2.吸收液（0.005mol/L）：使用实验室的1mol/L的H2SO4，取1.25mL，配250mL。
3.氨标准工作液（1mg/L）?：使用新购置的氨标准贮备溶液，取0.1mL，配100mL。
4.无氨水使用实验室的纯化水，之前用来做酚试剂测甲醛时无异常。

根据是按照GBT 18204.2-2014 《公共场所卫生检验方法 第2部分 化学污染物》进行分析的吧。楼主的曲线是直接没显色，楼主上述考虑的多了，首先1、吸收液问题不会造成不显色，用水一样可以；2、和无氨水也没关系，纯水不合格只会造成空白偏高而不是不显色，楼主通过甲醛来证明也没意义；3、亚硝基铁氰化钠是催化剂，也不会造成最终不显色。

个人经验可能出现问题的点有：1、标准溶液的问题，有可能失效了，但这个可能性不大，换一支新的试试，如果没有新的按照纳氏试剂方法测下即可；2、次氯酸钠中有效氯和有效碱含量问题，按照标准进行测量，或者参考HJ 536-2009，如下图


3、更换新的水杨酸试试

应助达人

建议参考标准GBT 18204.2-2014 《公共场所卫生检验方法 第2部分 化学污染物》8.1小节靛酚蓝分光光度法中溶液配制，问题可能出现在以下四点：
1.氨气吸收液配制过程的取液量错误导致，我之前出现过这种情况，就是硫酸的量取错导致的。楼主可以重新按照标准要求进行配制。
2.次氯酸钠试剂是否过期，次氯酸钠颜色是淡黄色。
3.水杨酸溶液配制过程中加入氢氧化钠量是否正确。
4.亚硝基铁氰化钠溶液（10g/L）浓度是否配制正确。

1.今日使用98%浓硫酸按标准配置的吸收液制作的标准系列，仍未显色，显色液颜色如图（显色液均为新购置）。但是使用1mol/L硫酸配制的吸收液加入水杨酸后会微泛黄，浓硫酸配制的则没有出现这种情况。
2.将氨标准工作液（1mg/L）不稀释，直接取10mL（即标准系列第7号管）依次加入显色液，呈绿色，测得吸光度为0.256，与之前同一号管吸光度（0.848）相差较大。
3.次氯酸钠的有效氯浓度尚未开展。

ztyzb(zxz19900120) 发表:今天做的靛酚蓝分光光度法的标准曲线的时候，标准曲线的颜色显色异常—深黄色，如图1，做了两组都是这样。
1.实验室用的试剂都是新购置的，水杨酸溶液（50g/L）、亚硝基铁氰化钠溶液（10g/L）、次氯酸钠溶液（0.05mol/L）、氨标准贮备溶液（1.00g/L）都是网上买已经配制好的。
2.吸收液（0.005mol/L）：使用实验室的1mol/L的H2SO4，取1.25mL，配250mL。
3.氨标准工作液（1mg/L）?：使用新购置的氨标准贮备溶液，取0.1mL，配100mL。
4.无氨水使用实验室的纯化水，之前用来做酚试剂测甲醛时无异常。

根据是按照GBT 18204.2-2014 《公共场所卫生检验方法 第2部分 化学污染物》进行分析的吧。楼主的曲线是直接没显色，楼主上述考虑的多了，首先1、吸收液问题不会造成不显色，用水一样可以；2、和无氨水也没关系，纯水不合格只会造成空白偏高而不是不显色，楼主通过甲醛来证明也没意义；3、亚硝基铁氰化钠是催化剂，也不会造成最终不显色。

个人经验可能出现问题的点有：1、标准溶液的问题，有可能失效了，但这个可能性不大，换一支新的试试，如果没有新的按照纳氏试剂方法测下即可；2、次氯酸钠中有效氯和有效碱含量问题，按照标准进行测量，或者参考HJ 536-2009，如下图


3、更换新的水杨酸试试

应助达人

楼主附图是显色后吗？有没有考虑是标准溶液的问题

Ins_93a7a110(Ins_93a7a110) 发表: 1.今日使用98%浓硫酸按标准配置的吸收液制作的标准系列，仍未显色，显色液颜色如图（显色液均为新购置）。但是使用1mol/L硫酸配制的吸收液加入水杨酸后会微泛黄，浓硫酸配制的则没有出现这种情况。
2.将氨标准工作液（1mg/L）不稀释，直接取10mL（即标准系列第7号管）依次加入显色液，呈绿色，测得吸光度为0.256，与之前同一号管吸光度（0.848）相差较大。
3.次氯酸钠的有效氯浓度尚未开展。

是的，经过试验，购买的氨标准溶液（1g/L）的浓度偏低，即使是没有按标准稀释至1mg/L的浓度，直接添加，测得的浓度也会偏低。实验室有25%分析纯的氨水，明天将尝试用该分析纯是否可以配制出所需溶液，以及是否会给标准曲线的配制带来积极影响。

关于次氯酸钠有效氯浓度的测试，请问有效氯浓度要达到什么程度才能判定该溶液合格呢？以次氯酸钠溶液（0.05mol/L）判定？

现在同事怀疑实验室纯水会造成影响，明天购置哇哈哈纯净水尝试一下（哈哈哈）

应助达人

楼主，个人经验纯水只会造成空白偏高不会偏低。至于次氯酸钠有效氯至少满足标准要求的浓度，有效氯是需要标定的

应助达人

这个方法还算比较简单的，多关注试剂空白什么的就好。

好的，我们没有根据《HJ 536-2009》进行测试，是根据GB/T 18204.2-2014中氨测定步骤中对次氯酸钠标定的方法进行标定，经过对次氯酸钠溶液的标定，还发现测试的次氯酸钠的浓度仅有0.0125，即所需浓度的1/4，已经向药品试剂供应商反馈了这个问题，但是他们说是我们标定的方法的问题，但是他们现在还没有具体的解决方法，后续开展可能会购买其他厂商的新的药剂进行测试，感谢大家的回答。

应助达人

次氯酸钠很容易出现有效氯低的问题。