β—受体激动剂检测内标回收不正常

想了很长时间就是找不到哪里的步骤做错了

应助达人

18年做的时候刚开始做激动剂，我记得回收率差不多70-80%的样子，回收率的话只要还是看你的前处理，但是你的回收率偏离这么大我是建议审查一下你的内标添加量和计算方式是不是有误哈

标准上最后定容体积是0.2ml，仪器吸不到就改为定容为1ml，内标是1000ppb加了5ul

是不是定容体积变动的太多了

应助达人

这个方法外标回收不高，如果内标加入不够准确的话很容易导致回收校准偏高。“1000ppb加了5ul”体积有点少了，我一般加至少20uL以上，一般50uL比较合适。我们用农业部1025-18号公告内标法做这三种回收基本都在100~110%之间很稳定的，该标准也是定容到200uL，不过现在仪器灵敏度高了，定容到1mL完全没问题。楼主可以试一下配制100ppb的标样和内标的中间液，然后加50uL，这样上机浓度也是5ppb，再做一下看回收率

内标加5ul，移液枪误差可能会有一点的。22286这个标准，需要酶解的，酶解效果比不酶解效果好很多的。

应助达人

“标准上最后定容体积是0.2ml，仪器吸不到就改为定容为1ml”------------------------用内插管就可以了，
“内标是1000ppb加了5ul”---------------------------------------------------添加体积的话控制在25-5ul是比较合适，我这边的话一般20/15ul用的多，22286我记得是10ng/ml-------100ul，从这个添加量来说你添加的内标量应该是没啥问题的（前提是前面做方法验证的时候这个浓度在你实验室稳定性没问题哈），但其实只要标液、样品和软件设置保持一致都问题不大

内标是在酶解后加的吗？

是在酶解之后加
建议严格按照标准 包括配置溶液的情况 尽量不要随意改动引入不确定风险