韭菜中农药残留检测去除硫化物方法比较
【摘要】韭菜属于基质复杂的蔬菜,在其农药残留检测的过程中,传统的样品前处理方法不能有效净化基质成分,因此导致目标残留化合物的检测分析容易产生严重的基质干扰现象。韭菜在样品被搅碎制备过程中,韭菜中的活性酶会使硫化物释放,这些硫化物与农药性质相似,且不易除去。分析会产生很大的干扰,影响定性与定量的准确性 ,有效去除挥发性含硫化合物是测定韭菜样品中农药残留的关键。基于此,本文开展试验对韭菜农药残留检测前处理技术进行优化,概述五种去除韭菜中硫化物方法，并进行比较 ，使得测定结果更加准确、高效。
关键词：韭菜;农药残留检测;硫化物
一、材料与方法
（一）试验仪器、试剂
Agilent GC 7890B气相色谱仪配有FPD检测器、自动进样器、分流/不分流进样口；高速分散均质机(上海标本模型厂)、氮吹仪、快速混匀器、电子天平；均浆机；氮吹仪。乙腈（色谱纯）、丙酮（色谱纯）、氯化钠（分析纯）。
（二）标准溶液的配制
标准溶液由农业部环境保护科研监测所提供，质量浓度均为100μg/mL。标液用丙酮稀释10.0μg/mL。
（三）实验方法
根据《蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留检测方法》（NY/T 761-2008）进行检测。
二、试验条件和过程
（一）气相条件
检测条件 色谱柱：VF-5MS（30m×0.25mm×0.25um）；温度：80℃保持1min，以20℃速度上升到130℃，再以5℃上升到200℃，再以15℃上升到250℃，保持11min。进样体积：1uL；进样品：250℃，不分流进样；检测器300℃；进样口温度：250℃；氮气流速：30mL/min；柱流速：2mL/min；空气流速：17mL/min；氢气流速14mL/min。
（二）对硫化物处理方法
（1）微波处理法
韭菜切成2CM小断，中高火微波加热40秒。（40秒既可以避免产生影响农药残留测定的硫化物，又可满足回收率要求。）
样品粉碎，准确称取25.0g试样, 加入50mL乙腈,在匀浆机中高速匀浆2min后用滤纸过滤。滤液收集到装有5-7g氯化钠的100mL具塞量筒中，盖上盖子，剧烈震荡1min，在室温下静置30in,使乙腈相和水相分层。用大肚管从100mL具塞量筒中分别移取10.00mL乙腈溶液于两个小烧杯中,将烧杯放在80℃水浴锅上加热,氮吹近干。
加标样品用丙酮定容至5mL,混匀、过滤膜后移入2mL进样瓶内，上机测定。
准确称取25.0g试样, 加入50mL乙腈,在匀浆机中高速匀浆2min后用滤纸过滤。滤液收集到装有5-7g氯化钠的100mL具塞量筒中，盖上盖子，剧烈震荡1min，在室温下静置30in,使乙腈相和水相分层。用大肚管从100mL具塞量筒中分别移取10.00mL乙腈溶液于两个小烧杯中,将烧杯放在80℃水浴锅上加热,氮吹近干。乙晴吹干后将烧杯在80℃水浴上继续加热3min,边加热边用氮气吹,以去除韭菜中影响有机磷农药残留测定的干扰物质。
加标样品用丙酮定容至5mL,混匀、过滤膜后移入2mL进样瓶内，上机测定。
加热时间分别取30 s、 1、2、3、4、5 min进行试验, 测定结果发现随着加热时间的增加,韭菜本底杂峰逐渐降低,加热时间在30 -4min范围内,农药的峰高无显著变化,故本试验加热时间取3min。
(3)磷酸处理法
称取200g韭菜，加入100mL的10%的磷酸溶液，搅碎、混匀。
准确称取25.0g试样, 加入50mL乙腈,在匀浆机中高速匀浆2min后用滤纸过滤。滤液收集到装有5-7g氯化钠的100mL具塞量筒中，盖上盖子，剧烈震荡1min，在室温下静置30in,使乙腈相和水相分层。用大肚管从100mL具塞量筒中分别移取10.00mL乙腈溶液于两个小烧杯中,将烧杯放在80℃水浴锅上加热,氮吹近干。
加标样品用丙酮定容至5mL,混匀、过滤膜后移入2mL进样瓶内，上机测定。
(4)低温处理法
准确称取25.0g冷冻试样、提取剂乙腈放入冰箱,取出样品解冻至2℃时， 加入50mL乙腈,在匀浆机中高速匀浆2min后用滤纸过滤。滤液收集到装有5-7g氯化钠的100mL具塞量筒中，盖上盖子，剧烈震荡1min，在室温下静置30in,使乙腈相和水相分层。用大肚管从100mL具塞量筒中分别移取10.00mL乙腈溶液于两个小烧杯中,将烧杯放在80℃水浴锅上加热,氮吹近干。
加标样品用丙酮定容至5mL,混匀、过滤膜后移入2mL进样瓶内，上机测定。
(5)乙酸微波处理法
韭菜切成2CM小断，称取200g韭菜，加入100mL的10%的磷酸溶液，中高火微波加热40秒，搅碎、混匀。
准确称取25.0g试样, 加入50mL乙腈,在匀浆机中高速匀浆2min后用滤纸过滤。滤液收集到装有5-7g氯化钠的100mL具塞量筒中，盖上盖子，剧烈震荡1min，在室温下静置30in,使乙腈相和水相分层。用大肚管从100mL具塞量筒中分别移取10.00mL乙腈溶液于两个小烧杯中,将烧杯放在80℃水浴锅上加热,氮吹近干。
加标样品用丙酮定容至5mL,混匀、过滤膜后移入2mL进样瓶内，上机测定。
表：五种方法处理韭菜样品回收率、相对标准偏差及检出限比较
农药名称 | 添加水平 0.2mg/kg(n=3) ① ② ③ ④ ⑤ |
检出限
mg/kg |
回收 相对标准 率/% 偏差/% | 回收 相对标准 率/% 偏差/% | 回收 相对标准 率/% 偏差/% | 回收 相对标准 率/% 偏差/% | 回收 相对标准 率/% 偏差/% |
毒死蜱 |
65.56 |
3.65 |
59.14 |
5.32 |
69.33 |
4.37 |
59.53 |
4.21 |
85.32 |
2.37 |
0.005 |
马拉硫磷 |
72.35 |
2.34 |
62.59 |
3.49 |
67.61 |
3.25 |
61.91 |
3.95 |
76.34 |
3.52 |
0.006 |
甲拌磷亚砜 |
59.56 |
2.52 |
69.37 |
3.53 |
79.62 |
3.64 |
69.25 |
3.28 |
79.62 |
3.25 |
0.008 |
水胺硫磷 |
89.37 |
1.32 |
84.27 |
2.39 |
74.51 |
2.89 |
64.55 |
3.14 |
94.28 |
2.69 |
0.008 |
三唑磷 |
94.32 |
1.25 |
84.64 |
2.41 |
80.94 |
3.12 |
70.56 |
3.63 |
90.38 |
3.77 |
0.007 |
伏杀磷 |
75.24 |
2.21 |
85.61 |
3.41 |
95.66 |
2.97 |
85.69 |
2.55 |
88.91 |
2.17 |
0.009 |
对硫磷 |
81.21 |
2.37 |
72.36 |
2.72 |
78.34 |
2.96 |
68.82 |
3.93 |
102.37 |
2.67 |
0.007 |
二嗪磷 |
77.54 |
3.51 |
62.59 |
3.54 |
66.91 |
2.82 |
76.90 |
2.45 |
99.52 |
3.51 |
0.006 |
乐果 |
59.51 |
4.32 |
69.55 |
4.38 |
79.45 |
4.21 |
69.56 |
3.28 |
101.59 |
2.39 |
0.008 |
①经过微波处理韭菜回收率、相对标准偏差及检出限
②经过加热处理韭菜回收率、相对标准偏差及检出限
③经过磷酸处理韭菜回收率、相对标准偏差及检出限
④经过低温处理韭菜回收率、相对标准偏差及检出限
⑤经过乙酸微波处理韭菜回收率、相对标准偏差及检出限
三、结果与讨论
1、采用微波处理法去除韭菜中硫化物，基质本底杂峰有所改善，平均回收率在59.51～94.32%之间。
2、采用加热处理法去除韭菜中硫化物，基质本底杂峰改善明显，但由于氮吹时间延长、氮吹干，回收率低，平均回收率在59.41～85.61%之间。
3、采用磷酸处理法，样品粉碎前加入磷酸，避免了有机硫化物的产生，有效去除韭菜中硫化物干扰，基质本底杂峰改善，平均回收率在66.91～95%之间。
4、采用低温处理法去除韭菜中硫化物，基质本底杂峰有所改善，平均回收率在59.53～85.69%之间。
5、采用乙酸微波处理法，样品粉碎前加入磷酸，并采用微波处理法去除韭菜中硫化物，避免了有机硫化物的产生，有效去除韭菜中硫化物干扰，基质本底杂峰改善明显，平均回收率在76.34～102.37%之间。
从以上分析结果可以看出：利用10%乙酸和40s中高火微波处理,可有效消除韭菜基质对有机磷农药残留检测干扰,消除部分韭菜本底峰干扰,从而有效地提高了韭菜中有机磷农药残留检测结果的准确性。本方法40秒既可以避免产生影响农药残留测定的硫化物，又可满足回收率要求。采用10%乙酸与中高强度的微波处理相结合的方法,可以使韭菜中活性酶快速失活,可有效去除干扰物质。本方法测定的有机磷农药品种只有9种,但利用本方法处理韭菜样品后,韭菜本底峰减少明显，有效消除韭菜基质对有机磷农药残留检测干扰,提高韭菜中有机磷农药残留检测结果的准确性,故此方法亦适用于其他有机磷农药检测。
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