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液相峰型太难看是什么问题

  • Ins_45d039e5
    2022/09/29
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 液相:C18,甲醇/乙腈(A)-0.1%甲酸/乙酸0-15:35-60%A;15-25:60-65%A(这个条件是从指纹图谱的条件中的一部分试出来的)样品峰对照品峰
    就像上图的问题:1样品峰基线不平,峰很小,分离度差 2对照品峰虽然分开了但是峰型难看(这几个对照品的最大吸收波长不同,我选了它们都能出峰的波长,不知道这个会不会有影响)请大家给点意见,是提取还是流动相选择和梯度问题,谢谢
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  • 123

    第1楼2022/09/29

    应助达人

    可能色谱柱柱效低

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  • xiaolanzi5

    第2楼2022/09/29

    应助达人

    对照品峰都有点前沿,感觉像柱子的问题。

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  • lwy1988

    第3楼2022/09/29

    因为你选取波长的原因,对照考虑下是不是因为浓度过大造成的前伸,可以看下最大吸收波长是不是有过载,然后,你这样品出峰时间和对照根本对不上啊,有其他辅助手段的话可以测下对照和样品的熔点,比较下,如果差距较大可以把样品干燥下再试下

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  • lwy1988

    第4楼2022/09/29

    补充下,溶剂峰在2.5分钟?貌似样品峰比主峰还大?样品是液体进样?建议如果想做定位确认,建议可以取样小试一批出来做成固体再进样

    lwy1988(lwy1988) 发表:因为你选取波长的原因,对照考虑下是不是因为浓度过大造成的前伸,可以看下最大吸收波长是不是有过载,然后,你这样品出峰时间和对照根本对不上啊,有其他辅助手段的话可以测下对照和样品的熔点,比较下,如果差距较大可以把样品干燥下再试下

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  • lwy1988

    第5楼2022/09/29

    说错,是溶剂峰比主峰还大?

    lwy1988(lwy1988) 发表:补充下,溶剂峰在2.5分钟?貌似样品峰比主峰还大?样品是液体进样?建议如果想做定位确认,建议可以取样小试一批出来做成固体再进样

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  • p3338543

    第6楼2022/09/30

    感觉柱子不太好,或者初始流动相与样品的相容性不够好造成的峰前沿?

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  • hnteng

    第7楼2022/09/30

    柱子有问题。所有峰都前延。

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  • 歌名

    第8楼2022/09/30

    应助达人

    1.先从方法方面来说哈--------------------------------第一个问题是洗脱的梯度太小了,可以尝试增加梯度变化,第二个是0.1%甲酸/乙酸是啥意思?一起用还是随意取一个用???混用或者一起用都不可取哈。
    点就像上图的问题:1样品峰基线不平,峰很小,分离度差-----------------------------------------把第一个建议试试在讨论这个就可以,很可能是洗脱梯度小加上样品基质复杂引起的,
    2对照品峰虽然分开了但是峰型难看(这几个对照品的最大吸收波长不同,我选了它们都能出峰的波长,不知道这个会不会有影响)------------------------------------------------------------------------峰型难看是因为溶剂效应,标液和样品最后溶解/稀释都用流动相初始比例去稀释/溶解,会改善很多。方法中设置多波长去泡不会影响峰型但是会增加背景噪音,化合物的检出限会变高变大。

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