液相色谱柱压突然升高，冲洗一夜还是不行，咋回事

应助达人

a.气泡堵住了。这种情况不但柱压高，而且波动大。用纯的甲醇或者乙腈低流速冲洗，色谱柱出口朝上，尽量让气泡从上面流出来

b.盐堵住了。这个只能是10-15%的甲醇水冲洗，把柱温加到35℃。看看能不能把盐溶出来

c.强保留物质。这个几乎没办法冲洗，每一根就柱子的柱前都不是填料本身的白色，而是黄色的。这个就是……样品溶液中的强保留物质。所以样品进入仪器前一定要过滤！拿甲醇反冲冲冲看吧，运气好可以冲掉。

d.微生物。一般老实验员不会犯这种错误，纯水或者纯盐的流动相，即便过滤了，最多放置一天。再久就会长细菌了。这个你自己看看流动相的瓶子，把里面的流动相倒出来，摸摸瓶壁如果滑滑的，那就是长细菌了。这个挺麻烦的，先用纯甲醇冲洗，然后用DMF低流速冲洗

应助达人

楼主，压力突然升高，一般都是由于流路中有堵塞的原因。此时，我们应该分段进行检查。可以参考如下资料：

1、先断开真空泵的入口处，此时PEEK管里充满液体，使PEEK管低于溶剂瓶，看液体是否自由滴下，如果液体不滴或缓慢滴下，则是溶剂过滤头堵塞。

处理方法：用30%的硝酸浸泡半个小时，在用超纯水冲洗干净。如果液体自由滴下，溶剂过滤头正常，再检查;

2、打开Purge阀，使流动相不经过柱子，如果压力没有明显下降，则是过滤白头堵塞。

处理方法：将过滤白头取出，用10%的异丙醇超声半个小时。如果压力降至100 PSI(6.7 Bar)以下，过滤白头正常，再检查;

3、把色谱柱出口端取下，如果压力不下降，则是柱子堵塞。

处理方法：如果是缓冲盐堵塞，则用95%的水冲至压力正常。如果是一些强保留的物质导致堵塞，则要用比现在流动相更强的流动相冲至压力正常。假如按上面的方法长时间冲洗压力都不下降，则可考虑将柱子的进出口反过来接在仪器上，用流动相冲洗柱子。这时，如果柱压仍不下降，只有换柱子入口筛板，但一旦操作不甚，很容易造成柱效下降，所以尽量少用。

应助达人

把柱前筛板换一下