Biochrom 30型氨基酸分析仪使用心得
Biochrom 30型氨基酸分析仪是英国Biochrom公司生产的氨基酸专用分析仪,所谓专用意思就是“只能作为氨基酸分析检测使用,检测别的组分不能用”。这台仪器是单位在2005年左右购置的,据说当时花费了几十万大洋,在我看来几十万买一台只能检测单一类别组分的仪器有点不可思议,除非检测氨基酸样品非常多,不然性价比确实有点低,但国家标准《GB 5009.124 食品安全国家标准 食品中氨基酸的测定》规定的氨基酸检测方法一直都是氨基酸分析仪法,为了检测这个参数必须配制这类仪器。
感慨了一番,言归正传,下面我简单谈一谈这台仪器的使用感受。我想用过氨基酸分析仪的小伙伴都了解该仪器的原理是利用茚三酮溶液与氨基酸共热生成氨,氨再与茚三酮和还原性茚三酮反应,生成的化合物在570(蓝紫色)/440(浅黄色) nm波长处检测。这里需要自己配制茚三酮溶液,我清楚的记得第一次配置时没带手套,结果茚三酮粘在手上和蛋白发生反应,手上的蓝紫色足足洗了一个星期才颜色才褪去,以后再也不敢不带手套配制了。
其实氨基酸分析仪也是液相色谱的一种,前端分离系统用的是阳离子交换柱,利用不同结构氨基酸在柱子上吸附强度不同,用不同离子强度、pH值的缓冲溶液依次将氨基酸从色谱柱上洗脱下来。缓冲液一共需要六种,每次配制都是一项浩大的工程(当然也可以直接买现成的),再加上茚三酮的配制,做一次氨基酸分析实验准备工作基本需要两天,因此我们都是多攒几个样品再一起检测。
总之,氨基酸分析仪给我的感觉就是使用起来太麻烦,不过灵敏度确实很高,稳定性比柱前衍生法要好,该类仪器适合有长期大批量氨基酸分析样品的单位。现在也有很多仪器公司推出了液相色谱氨基酸分析包,特别是UPLC系统把分析时间从氨基酸分析仪一针1 h以上缩短到不到20 min,大大提高了检测效率,关键是不需要单独配制专用的氨基酸分析仪,很适合氨基酸样品量少的单位,不过目前还没有纳入国标方法,我想随着氨基酸分析方法的不断完善,以后应该会有更多的氨基酸检测方法列入检测标准。