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相同梯度,3针之间出峰延迟,峰间隔增加

  • Ins_10b0ecfd
    2022/12/20
  • 私聊

液质联用(LCMS)

  • 为什么呢?怎么保证重现性呢?
    是不是和流动相关系最大?
    流动相:水(0.1%FA+5mM乙酸铵)-乙腈(0.1%FA)
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  • hujiangtao

    第1楼2022/12/20

    应助达人

    这个流动相体系应该挺稳定的,UPLC柱的保留时间重现性很好,如果是普通色谱柱可能保留时间重现性稍微差一些

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  • xiaolanzi5

    第2楼2022/12/20

    应助达人

    乙酸铵是不是现配的?乙腈是不是新鲜的?每针进样前初始流动相平衡时压力有没有大的变化?

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  • Ins_10b0ecfd

    第3楼2022/12/21

    用的Zorbax SB-Aq柱

    hujiangtao(hujiangtao) 发表:这个流动相体系应该挺稳定的,UPLC柱的保留时间重现性很好,如果是普通色谱柱可能保留时间重现性稍微差一些

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  • Ins_10b0ecfd

    第4楼2022/12/21

    都是当天早上配的。压力倒没有很大的变化,但是我是梯度前后都平衡1.5min,如果少了峰就明显变得很丑

    xiaolanzi5(xiaolanzi5) 发表:乙酸铵是不是现配的?乙腈是不是新鲜的?每针进样前初始流动相平衡时压力有没有大的变化?

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  • Ins_10b0ecfd

    第5楼2022/12/21

    第一针是刚开始进样走的,7分钟之内都出完了。换了几个梯度试了觉得不太行,还是第一个梯度好,就重新用第一个梯度进了一针,结果峰展宽了3倍,出峰时间也延迟了1倍,后面的几个峰的分离度还变差了,再进了一针也一样。不知道是什么原因?

    hujiangtao(hujiangtao) 发表:这个流动相体系应该挺稳定的,UPLC柱的保留时间重现性很好,如果是普通色谱柱可能保留时间重现性稍微差一些

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  • Ins_10b0ecfd

    第6楼2022/12/21

    第一针是刚开始进样走的,7分钟之内都出完了。换了几个梯度试了觉得不太行,还是第一个梯度好,就重新用第一个梯度进了一针,结果峰展宽了3倍,出峰时间也延迟了1倍,后面的几个峰的分离度还变差了,再进了一针也一样。不知道是什么原因?

    xiaolanzi5(xiaolanzi5) 发表:乙酸铵是不是现配的?乙腈是不是新鲜的?每针进样前初始流动相平衡时压力有没有大的变化?

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