【求助】有关孔雀石绿、结晶紫回收率的问题？

再给大家说说我的前处理方法，希望各位大侠能帮我分析一下。
提取：
称5g样品于50ml离心管中，加入20ml乙腈，用均质机均质，然后4000r/min离心。收集乙腈提取液，然后再加入25ml乙腈重复提取一次，合并上清液。
净化：
将酸性氧化铝柱装好（自制），用10ml乙腈活化，将提取液过酸性氧化柱，提取两次，再用10ml乙腈清洗氧化铝柱，合并溶液。浓缩至近干（水浴40度），残留物用1ml乙腈和1ml0.1％乙酸溶解，超声波清洗约3分钟。提取液移入5ml离心管中，振荡混匀，于16000r/min下离心。过0.2um滤膜后上机。

不过柱子回收率还行，孔雀石绿-隐色孔雀石绿都在85%左右，不过跟你做的方法不一样，称5克样，加盐酸羟胺（25%）1.5ml，缓冲液（乙酸纳4.95-对甲苯磺酸0.95）5ml，加对甲苯磺酸1mol/l 2.5ml，每次加10ml乙腈提取，提3次。用二氯甲烷提两次。浓缩，用1ml乙腈定容，过膜，进样。

用液质检，用HPLC 620的波长。

我们只有HPLC

我以前做的时候回收率都在80~95%之间啊。洗脱液不一样吧。你调ph没有啊

没看见我写了，HPLC620的波长

考虑显性隐性可以转化.