150mm的色谱柱和250差别大吗

应助达人

在缩短分析时间的同时，为了使得分离度不受影响，我们可以同时减小色谱柱的长度和填料粒径。如果考虑梯度延迟体积和实际的柱外扩散效应，对 HPLC 系统进行合理的优化，很容易获得平衡的效果。例如，一根 5 μm 粒径、250 mm 柱长的色谱柱可以被 3 μm粒径、150 mm 柱长的色谱柱所取代。换而言之，如果长度与粒径的比例相等，则认为这两根色谱柱具备相同的分离能力。溶剂消耗量成比例减少，并且，如果可以成功注入相等质量的被分析物，由于其以相同的效率在一根较小的色谱柱中运行，色谱峰的稀释作用降低了，因而灵敏度也将得到提高。


而对同样填料的柱子，如果将柱长加倍，将得到更多的理论塔板数，但分离时间也将延长 2 倍，而分离度只能得到 2 的平方根即1.4倍的提高。250mm柱子相对150mm柱子，填料，粒径一样，柱效只能提高sqr(250/150)=1.29倍。