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多维液相色谱技术,2020版药典中新增的多维液相色谱你真的了解吗?

液相色谱(LC)

  • 2020版药典高效液相色谱法中新增了多维液相色谱,还不了解的小伙伴们快来看看吧!



    一维液相色谱的不足

    色谱作为复杂混合物的重要分离分析工具,对化合物的分离分析起到了很大的作用。目前使用的大多数仪器都是一维色谱,仅用一根柱子,就可以对含几十种甚至是几百种物质的样品进行分离分析。但是当样品更为复杂时,例如有人分析蛋白组学,这时就需要用到多维色谱技术。

    多维液相色谱的优势

    多维液相色谱又叫色谱/色谱联用技术,是采用匹配的接口将不同分离性能或特点的色谱连接起来,将第一级色谱中未分离或需要分离富集的组分由接口转移到第二级色谱中,第二级色谱仍需进一步分离或分离富集的组分,也可以继续通过接口转移到第三级色谱中,以此类推......

    理论上,是可以通过接口将任意级色谱串联或者并联起来,直至将混合物样品中所有难分离、需富集的组分都分离或富集。但实际上,一般只要选用两个合适的色谱联用就可以满足绝大多数难分离混合物样品的分离或富集要求。因此,一般的色谱/色谱联用都是二级,即二维色谱。



    以杭州赛智科技的多维液相色谱为例,可以应对各类石油化工、环境污染物、体液、食品等复杂样品,实现更满意的分离结果。同时,搭配自动进样器等设备可升级拓展成为固相萃取联用液相色谱系统,实现复杂基线样品在线分离、峰聚焦、检测补偿等,大大提高系统分离能力。另外,搭载赛智科技的SURVEY色谱数据工作站,全面符合GLP/GMP、FDA、21 CFR PART 11、2020版药和CTD格式要求,全面匹配色谱柱信息,用户管理,权限设置、电子签名和批处理,系统适应性评价(SST)等审计追踪功能。



    二维液相色谱分类

    二维液相色谱可以分为差异显著的两种类型。一种是中心切割式二维色谱,另一种是全二维色谱。

    中心切割式二维色谱(LC-LC):两种色谱的联用仅是通过接口将前一级色谱中某一组分传递到后一级色谱中继续分离。

    全二维色谱(LC×LC):两种色谱联用,接口将前一级色谱中的全部组分连续地传递到后一级色谱中进行分离。

    此外,这两种类型下还有若干子类型,包括选择性二维色谱(sLC×LC)和多中心切割2D-LC(mLC-LC)等。



    核心技术“接口”的作用

    接口技术是实现二维色谱分离的关键之一,是将第一维色谱中组分转移至第二维色谱的切换阀组件,这部分硬件的选择和性能直接影响着第一维和第二维分离的很多方面以及系统的总体性能,并且它充当第一维的收集器和第二维的进样器的角色。原则上,只要有匹配的接口,任何模式和类型的色谱都可以联用。



    赛智科技专利设计的六通阀,作为推荐的稳定接口,适用于单/多中心切割、全二维、选择性全二维等全部二维分离模式。可以用于一根柱子切换两个流路,主要用于固相萃取、反冲、旁路、系统清洗等;也可以用于一个流路中切换一根柱子方向或者一个流路中切换两根柱子。



    近年来,由于二维液相色谱对样品前处理要求远没有液-质联用方法高,而二维液相色谱的应用又提高了液相色谱的指向性,减少了峰重叠和多组分保留时间集中的误差,因此成为色谱分析新趋势,被广泛应用于食品分析、维生素分析、蛋白组学分析、体内药物分析、杂质分析等多个研究领域中复杂样品的分析,未来也会被应用到更多新领域。
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